Tribulus Terrestris에서 사포닌을 추출하는 방법은?

트리불루스 테레스트리스 (Tribulus terrestris), 하드 트리불루스 (hard Tribulus), 화이트 트리불루스 (white Tribulus) 라고도 한다.쓰고, 자극적이며, 성질이 따뜻하고, 약간 독성이 있으며, 간 통로로 들어간다.두통과 어지럼증, 풍진과 가려움증, 흉부와 hypochondrium distending pain, 유방 폐쇄와 유방염, 붉은 눈과 눈 폐쇄, 소모성 갈증 등 1]을 치료하는 데 사용됩니다.연구 결과, 특히 트리불루스 테레스트리스 사포닌 추출물 (Tribulus terrestris saponins)은 심혈관 건강 개선, 성기능 강화, 혈중 지질 저하, 혈당 저하, 노화 방지, 항종양 [2] 등의 약리학적 효과가 있음이 확인되었다.

트리불루스 테레스트리스 (Tribulus terrestris)에 함유된 활성 성분의 추출과 분석은 추후 활용과 연구의 기초가 된다.이 글에서는 총 트리불루스 사포닌에 대한 추출 방법과 함량 분석 및 시험 방법에 대해 검토한다.여러 추출법을 비교하고 각 방법의 장단점을 분석함으로써 추후 트리불루스 사포닌에 대한 연구를 위한 기초자료를 제공한다.

에 대한 1가지 추출방법tribulus terrestris의 total saponins

문헌 보고 [4-8]에 따르면, Tribulus terrestris의 총 사포닌에 대한 추출 방법은 주로 용매 추출법을 사용한다.용매 추출 방법은 전통적인 용매 추출 [145], 마이크로파 추출 [67], 초음파 추출 [8]으로 요약할 수 있다 (마이크로파 추출과 초음파 추출은 현대적인 용매 추출 방법으로 분류할 수 있다).본 논문은 위의 세 가지 방법에 따라 설명될 것이다.

1.1전통적인 용매 추출 방법

용매추출법은 like 가 like를 녹인다는 원리에 따라 원료에서 적절한 용매를 선택하여 화학성분을 추출한다.사포닌은 일반적으로 물, 메탄올, 묽은 에탄올에 용해되고 뜨거운 물, 뜨거운 메탄올, 뜨거운 에탄올에 쉽게 용해되며 에테르, 클로로포름, 벤젠에는 용해되지 않는다.그 중 사포닌을 추출하기 위해 에탄올과 물을 사용하는 경우가 많다.사포닌을 추출하는 전통적인 방법에는 마세레이션법, 탈지법, 역류추출법 등 여러 가지가 있다.일반적으로 총트리불루스 사포닌을 추출하기 위해 물을 용매로 사용하는 알코올 강수법이 사용된다.이 방법은 물을 용매로 사용하고, 역류 추출, 여과 및 농도를 이용하여 추출물을 얻는다.그런 다음, 다른 농도 경도의 에탄올을 추출물에 첨가합니다.보통 알코올 함량이 40%~80% 가 되면 녹말, 다당류, 덱스트린, 아미노산 껌점액, 단백질 등의 성분을 제거할 수 있으며 사포닌은 여과 액 속에 남는다 [3].또한 알코올 추출 컬럼법, 알코올 추출 농도법 등 알코올 추출 방법도 있다.

왕샤오양 등 14명은 역류 추출을 위한 용매로 에탄올을 사용하여 알코올 추출 컬럼 방법을 사용하였다.트리불루스 테레스트리스 사포닌의 우선추출공정을 위한 직교시험법에서는 3가지 방법을 사용하였으며, 그 중 알코올 추출 컬럼법을 70% 에탄올로 3회, 2h씩 환류하여 대성 흡착수지로 처리한 후 농축하고 건조하여 생성물을 얻었다.건조된 Tribulus terrestris 추출물의 saponin 함량은 43.23% 였으며, 추출율은 80.31% 이었다.조제연 등 5명은 트라이불로스 사포닌을 추출하기 위한 가장 좋은 과정은 75% 에탄올을 매번 1시간 동안 3회 역류시키는 것을 알콜 농도법으로 직교실험을 하였다.그 결과 총 52개의 saponin 함량을 얻을 수 있었다.19%다.두 방법 모두 추출률이 높지만 일반적으로 불순물이 더 많아 산업 생산에 사용할 수 있습니다.요컨대, 전통적인 용매 추출법은 조작이 간단하고 비용이 저렴하다는 장점 때문에 일반적으로 총 트리불루스 사포닌을 추출하는 데 사용되고 있다.하지만 추출 시간이 길고 안전성이 떨어지는 등 단점도 있다.

1.2 마이크로파 추출법

마이크로파 보조 추출법은 마이크로파를 이용해 물질을 추출하는 방식으로 새롭게 개발된 추출법이다.이 방법에서는 전자파가 용매로 방사되어 세포벽을 통과하여 세포내부까지 도달한다.극성 용매 및 셀 액체가 마이크로파 에너지를 흡수하기 때문에 셀 내부 및 근처의 온도가 증가하고 기화 압력이 증가합니다.압력이 세포벽의 지지력을 초과하면 세포벽이 파열되고, 세포내부에 위치한 활성성분이 세포에서 방출되어 용매로 전달된다.

이 기술은 천연 물질 추출에 적합하며, 높은 효율, 속도 및 선택성의 요구 사항을 제한 없이 충족시킬 수 있습니다.Li 등 6은 euphol의 추출공정 조건을 최적화하기 위해 직교법을 사용하였다.최적 공정조건은 시료량 0.18-1.15 mm, 추출시간 5분, 마이크로파 파워 500 W, 고상-액비 1:20 (g·mL ¹), 측정된 스테롤 함량 91.3% 이었다.따라서 마이크로파를 이용한 추출은 기존의 방법보다 빠르고 효율적이며, 균등한 가열, 용매 절약, 간단한 공정, 폭넓은 응용이 가능한 장점이 있다.그러나 아직까지 이론과 적용에 있어서 일정한 한계를 지니고 있다.현재 마이크로파 추출기술과 설비는 공업생산에 거의 사용되지 않으며 [7] 더욱 제고할 필요가 있다.

1.3초음파 추출법

초음파는 고속의 강한 cavitation 효과와 휘젓는 작용을 일으켜 약초속의 세포를 파열시키고 용매가 세포속에 침투하게 함으로써 용매속의 약초의 유효성분의 용해를 가속화시킨다.천연물 의약품 성분 추출에이 기술을 적용한 것은 최근 들어 더욱 폭넓게 발전했다.사포닌의 추출에서 아글리콘 구조의 파괴를 피할 수 있다.초음파 추출은 기존의 방법과 비교하여 추출시간과 추출율에서 분명한 장점이 있다.이 기술은 총 트리불루스 사포닌을 추출하는 연구에서도 많이 사용되고 있다.장주홍 등 8명은 묽은 에탄올을 용매로 30분 동안 초음파 추출하여 Tribulus terrestris의 총 사포닌 함량을 측정하였다.그리고 나서 대성 흡착수지를 이용하여 정제하였다.첫 번째 데이터 세트에서 총 트리불러스사포닌의 최대 함량은 2.8%였다.이 방법은 추출시간을 단축시키고 추출률을 높일뿐만아니라 초음파추출이 활성성분의 구조를 변화시키지 않도록 한다.따라서 초음파 보조 추출은 일반적으로 사용되는 현대 용매 추출 방법 중 하나이다.

요약하면, 상기 세 가지 다른 추출 방법을 비교, 분석함으로써 각각의 장단점을 알 수 있으며, 이는 트리불루스 테레스트리스로부터 총 사포닌을 효과적으로 추출할 수 있는 기준을 제공한다.표 1을 참조.

트리불루스 테레스트리스 (Tribulus terrestris)의 총 사포닌 분석 및 시험방법 2

의 분석을 위한 일반적인 방법tribulus terrestris 총 사포닌에는 초가시광선 분광광도계가 포함된다[10-13], 고성능 액체 크로마토그래피 [14.5], 모세관 전기영동 [161 등.또한, 페이퍼 칩 방식은 트리불루스 테레스트리스 토탈 사포닌 결정에도 적용될 것으로 기대된다.

2.1초가시광선 분광광도계

자외선분광광도법은 총 트리불루스 사포닌의 함량을 결정하는 가장 일반적인 방법이다.이 방법은 유색 물질 뿐만 아니라 공액 구조를 가진 무색 물질도 정확하게 측정할 수 있다 [9].Li Yan 등 10명은 기준물질로 Tribulus terrestris에서 단량체 saponin 성분을 사용하였고, 색시약은 E 시약과 황산의 에탄올 용액, 결정파장은 520 nm 이었으며, 그 결과 기준물질의 양과 0.06-0.2 mg 범위에서 흡광도 값 사이에 양호한 선형관계가 있음을 알 수 있었다.Li Ying 외.원산지에 따른 삼환나무의 품질 차이를 비교할 때, 삼환나무 열매 중의 총 사포닌 함량을 UV-Vis 분광광도계를 이용하여 확인하였다.기준으로 diosgenin 물질을 사용 하여, 색깔의 선택 현상액을 사용 하여을 탐구 했었HCIO ₄:vanillin (5%)로 4:1이다.그 결과 diosgenin 즐거운 선형 관계의 범위에서 7.52-150.4 μ g, 높은 복구 률을과 강 한 안정 성이다.

장평 등 12명은 자외선 분광광도법을 이용하여 다양한 기원으로부터 트리불루스의 총 사포닌 함량을 확인하였다.Tribulus terrestris 제어 물질로 사용 되었고, 그 결과는 좋았다는 것을 보여주 선형 관계의 범위에서 7.52-150.4 μ g.장 Sujun et al. [13 자외선 spectrophotometry 사용 기준으로 diosmin 물질과 색상을 탐지 310 nm의 파장 및 개발 업자의 HCIO ₄을 결정하는 총에 사포 닌 콘 텐 츠의 과일과 줄기와 잎 Tribulus terrestris 다른 수확 시기에 결과를 비교 하기 위해 서다.트리불루스 테레스트리스 (Tribulus terrestris) 줄기와 잎의 총 사포닌 함량은 열매보다 훨씬 높은 것으로 나타났으며, 줄기와 잎의 총 사포닌 함량은 7월에 가장 높은 것으로 나타났다.요컨대 자외선 분광광도법은 다른 분광분석법에 비해 장비 및 조작이 비교적 간단하고, 비용이 저렴하며, 분석속도가 빠르고, 민감도가 높다는 장점이 있어 사포닌 분석에 많이 사용된다.

고성능 액체 크로마토그래피 2.2

고성능 액체 크로마토그래피가 대중화되면서 점점 더 많은 사포닌 성분이이 방법을 사용하여 검출되고 있다.고성능 액체 크로마토그래피는 이동상으로 액체를 사용하며, 고압 주입펌프를 사용하여 단일 또는 혼합 용매, 버퍼 또는 기타 이동상을 이송하여 시료가 움직이게 하여 성분이 분리되도록 시험한다.매우 민감한 검출기는 이를 검출 가능한 신호로 전환하여 정성 및 정량 분석이 가능합니다.그 중 검출기는 실험실 환경과 사포닌 자체의 특성에 따라 판별할 필요가 있다.특징적인 자외선 흡수가 되지 않아 자외선 검출기를 사용하여 검출할 수 없는 디오게닌과 같은 일부 사포닌의 경우 광산란 검출기를 사용해야 한다.Li Haoyue et al. 114는 Tribulus terrestris의 품질을 제어하기 위해 colorimetry와 결합된 HPLC를 사용하였다.웰치 얼티밋 LP-Ci 8 컬럼은 이동상으로 메탄올:물 (80:20)을 사용하였다.Tribulus terrestris saponin을 검출하고 이를 지수로 사용하여 연구하였다.모두에서 그 결과 HPLC 방법과 colorimetric 방법, Tribulus 사포 닌 0.820 사이 좋은 선형 관계를 가지고 있고 7.380 μ g와 24.600 86.100 μ g,게의 평균 회수 율은 99.과 99.5%.이 방법은 간단하고 쉽게 수행할 수 있으며, 빠르며, 분리 효율이 높고, 감도가 높으며, 측정 결과가 정확하다는 특징이 있습니다.Tribulus 함량을 결정하는 데 적합하다.

모세관 전기영동 2.3

모세관 전기영동 (Capillary electrophoresis)은 이온이나 핵입자가 높은 전압의 전기장에 의해 구동되어 모세관 속에서 분리되는 액체 크로마토그래피 기술이다.그 중 고효율 모세관 전기영동은 널리 사용되고 있다.원료 약초의 분석이든 완제의약품의 분석이든 분리 및 분석에서의 독특한 장점으로 한약재 및 천연물의약품의 유효성분의 분리 및 정량결정에 어느 정도 진전이 있었다 [161].CE 기술의 인기가 증가함에 따라 실험 비용, 분리 효율, 분리 속도, 마이크로 정량 및 적응성 면에서 HPLC보다 우수합니다.분석효율이 높고, 주입량이 작으며, 조작이 간단하고, 분석비용이 저렴하며, 모세관 컬럼이 쉽게 오염되지 않는 장점이 있다.[171.이 방법은 천연약물의 활성성분의 함량을 분리, 결정하는데 널리 리용되고있다.그러나 현재 Tribulus terrestris의 총 사포닌을 검출하기 위해 capillary electrophoresis를 이용했다는 보고는 많지 않다.

2.4 종이칩 결정 방법

종이칩 미세유체 기술은 간편하고 빠른 처리, 사용 편의성, 저렴한 비용으로 인해 의료 진단, 식품 안전 시험, 환경 모니터링 및 기타 분야에 널리 사용되는 새로운 유형의 미세유체 기술이다.기본 원리는 종이 표면에 채널을 형성하여 유체 I18]를 유도하는 것이다.그 중 소수성 물질로 여과지에 채널을 형성하는 방법은 현재 가장 일반적으로 사용되는 방법으로, 종이에 친수성-소수성 대비 지도를 그려서 [19] 종이에 미크론 규모의 모세관 채널을 만드는 방법이다.모세관 힘에 의해 특정 영역으로 솔루션이 구동될 수 있으므로 외부 장비가 필요하지 않습니다.일반적으로 사용되는 검출방법에는 주로 광도검출 [201, 형광, 전기화학발광, 전기화학검출법 등이 있으며, 그 중 광도검출법은 가장 직관적이고 일반적으로 사용되는 방법이다.

Wu Jian 등 2명은 종이칩을 이용하여 Fructus Gardeniae의 유효성분 phloretin을 검출하였고 만족할 만한 결과를 얻었다.하오 정하 등 1221명은 시험 중 색 발현 시간의 차이를 없애기 위해 미세유체 종이칩을 이용하여 차 폴리페놀의 함량을 빠르게 검출하였다.이 방법을 이용하여 서로 다른 희석된 차 시료를 발색 반응 시작 후 3분 이내에 신속하게 시험하였으며, 얻어진 결과는 기존의 방법과 잘 일치하였다.다수의 문헌 보고에 따르면 종이칩 미세유체 기술은 표준 방법에 비해 시간을 크게 단축시키고 전문 실험실 장비를 필요로 하지 않으며 현장 검출에 사용할 수 있어 확실한 실제 응용 가치가 있다.따라서 종이칩은 전통 한의학의 신속한 분석 및 감지에 사용될 수 있으며 넓은 응용 전망을 가지고 있습니다.현재 tribulus terrestris 총 사포닌의 검출을 보고한 문헌은 없으며,이 방법은 분석 판정에 있어 첨단의 연구 분야가 될 수 있다.

결론 및 전망 3

tribulus terrestris total saponins을 추출하는 세 가지 방법의 장단점에 대한 비교는 관련 연구자들에게 참고가 될 수 있으며, 이들은 다양한 요구에 따라 적절한 추출법을 선택할 수 있다.tribulus terrestris total saponins을 검사하기 위한 자외선 분광광도법과 고상 액체 크로마토그래피법은 대중화된 기기 및 장비와 간단한 조작이 가능하다는 장점 때문에 널리 사용되고 있다.모세관 전기영동과 종이 미세유체 기술이 분리 및 분석 기술로 부상하고 있다.모세혈관전기영동은 천연약품의 분석에서 광범위한 응용전망이 있으며이 령역에서 중대한 진전이 이룩되였다.종이 미세유체 기술은 빠르고 간단하다는 장점 때문에 다양한 분야의 연구에 사용되고 있다.과학기술이 발전함에 따라 추출방법과 검출기술은 계속 향상될것이며 천연약품과 전통한약의 연구개발에 더 잘 봉사할것이다.

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