Tribulus Terrestris에서 사포닌을 추출하는 방법은?

Tribulus terrestris, also known as tribulus, hard tribulus, or white tribulus다. Bitter, pungent, warm in nature, slightly toxic, enters the liver channel. Used to treat headache and dizziness, wind rash and itching, chest and hypochondrium distending pain, breast obstruction and mastitis, red eyes and eye obstruction, consumptive-thirst, etc. 1]. Studies have confirmed that Tribulus terrestris extract, especially tribulus terrestris saponins, has pharmacological effects such as improving cardiovascular health, enhancing sexual function, lowering blood lipids, lowering blood sugar, anti-aging, and anti-tumor [2].

트리불루스 테레스트리스 (Tribulus terrestris)에 함유된 활성 성분의 추출과 분석은 추후 활용과 연구의 기초가 된다.이 글에서는 총 트리불루스 사포닌에 대한 추출 방법과 함량 분석 및 시험 방법에 대해 검토한다.여러 추출법을 비교하고 각 방법의 장단점을 분석함으로써 추후 트리불루스 사포닌에 대한 연구를 위한 기초자료를 제공한다.

트리불루스 테레스트리스 (tribulus terrestris)의 총 사포닌 추출 방법 1

문헌 보고 [4-8]에 따르면, Tribulus terrestris의 총 사포닌에 대한 추출 방법은 주로 용매 추출법을 사용한다.용매 추출 방법은 전통적인 용매 추출 [145], 마이크로파 추출 [67], 초음파 추출 [8]으로 요약할 수 있다 (마이크로파 추출과 초음파 추출은 현대적인 용매 추출 방법으로 분류할 수 있다).본 논문은 위의 세 가지 방법에 따라 설명될 것이다.

1.1전통적인 용매 추출 방법

The solvent extraction method is based on the principle of like dissolves like, and the chemical components are extracted from the raw material by selecting an appropriate solvent. Saponins are generally soluble in water, methanol and dilute ethanol, easily soluble in hot water, hot methanol and hot ethanol, and insoluble in ether, chloroform and benzene. Among them, ethanol and water are often used to extract saponins. There are many traditional methods for extracting saponins, such as the maceration method, the decoction method, and the reflux extraction method. The alcohol precipitation method using water as the solvent is generally used to total tribulus saponins을 추출합니다. The method uses water as a solvent, reflux extraction, filtration and concentration to obtain the extract. Then, ethanol of different concentration gradients is added to the extract. Usually, when the alcohol content is 40% to 80%, components such as starch, polysaccharides, dextrin, amino acid gum mucilage, and protein can be removed, and the saponin remains in the filtrate [3]. There are also alcohol extraction methods, such as the alcohol extraction column method and the alcohol extraction concentration method.

Wang Xiaoyang et al. 14 used the alcohol extraction column method, with ethanol as the solvent for reflux extraction. In the orthogonal test method for the preferred extraction process of tribulus terrestris saponins, three methods were used, of which the alcohol extraction column method was refluxed with 70% ethanol for 3 times, 2h each time, treated with macroporous adsorption resin, concentrated and dried to obtain the product. The results showed that the content of saponin in the dried Tribulus terrestris extract was 43.23%, and the extraction rate was 80.31%. Cao Zhenyan et al. [5 used an orthogonal experiment with an alcohol concentration method to determine that the best process for extracting tribulus saponins is to reflux 75% ethanol three times for 1 hour each time. The result was a total saponin content of 52. 19%. Both methods have a high extraction rate, but generally have more impurities and can be used for industrial production. In short, the traditional solvent extraction method is generally used to extract total tribulus saponins because of its advantages of being simple to operate and low cost. However, it also has some disadvantages, such as a long extraction time and low safety.

1.2 마이크로파 추출법

마이크로파 보조 추출법은 마이크로파를 이용해 물질을 추출하는 방식으로 새롭게 개발된 추출법이다.이 방법에서는 전자파가 용매로 방사되어 세포벽을 통과하여 세포내부까지 도달한다.극성 용매 및 셀 액체가 마이크로파 에너지를 흡수하기 때문에 셀 내부 및 근처의 온도가 증가하고 기화 압력이 증가합니다.압력이 세포벽의 지지력을 초과하면 세포벽이 파열되고, 세포내부에 위치한 활성성분이 세포에서 방출되어 용매로 전달된다.

이 기술은 천연 물질 추출에 적합하며, 높은 효율, 속도 및 선택성의 요구 사항을 제한 없이 충족시킬 수 있습니다.Li 등 6은 euphol의 추출공정 조건을 최적화하기 위해 직교법을 사용하였다.최적 공정조건은 시료량 0.18-1.15 mm, 추출시간 5분, 마이크로파 파워 500 W, 고상-액비 1:20 (g·mL ¹), 측정된 스테롤 함량 91.3% 이었다.따라서 마이크로파를 이용한 추출은 기존의 방법보다 빠르고 효율적이며, 균등한 가열, 용매 절약, 간단한 공정, 폭넓은 응용이 가능한 장점이 있다.그러나 아직까지 이론과 적용에 있어서 일정한 한계를 지니고 있다.현재 마이크로파 추출기술과 설비는 공업생산에 거의 사용되지 않으며 [7] 더욱 제고할 필요가 있다.

1.3초음파 추출법

초음파는 고속의 강한 cavitation 효과와 휘젓는 작용을 일으켜 약초속의 세포를 파열시키고 용매가 세포속에 침투하게 함으로써 용매속의 약초의 유효성분의 용해를 가속화시킨다.천연물 의약품 성분 추출에이 기술을 적용한 것은 최근 들어 더욱 폭넓게 발전했다.사포닌의 추출에서 아글리콘 구조의 파괴를 피할 수 있다.초음파 추출은 기존의 방법과 비교하여 추출시간과 추출율에서 분명한 장점이 있다.이 기법은 또한 많은 연구에서 사용되어 왔다extract total tribulus saponins다.장주홍 등 8명은 묽은 에탄올을 용매로 30분 동안 초음파 추출하여 Tribulus terrestris의 총 사포닌 함량을 측정하였다.그리고 나서 대성 흡착수지를 이용하여 정제하였다.첫 번째 데이터 세트에서 총 트리불러스사포닌의 최대 함량은 2.8%였다.이 방법은 추출시간을 단축시키고 추출률을 높일뿐만아니라 초음파추출이 활성성분의 구조를 변화시키지 않도록 한다.따라서 초음파 보조 추출은 일반적으로 사용되는 현대 용매 추출 방법 중 하나이다.

요약하면, 상기 세 가지 다른 추출 방법을 비교, 분석함으로써 각각의 장단점을 알 수 있으며, 이는 트리불루스 테레스트리스로부터 총 사포닌을 효과적으로 추출할 수 있는 기준을 제공한다.표 1을 참조.

트리불루스 테레스트리스 (Tribulus terrestris)의 총 사포닌 분석 및 시험방법 2

tribulus terrestris 총 사포닌의 분석을 위한 일반적인 방법에는 초가시광선 분광광도계 [10-13], 고성능 액체 크로마토그래피 [14.5], 모세관 전기영동 [161 등이 있다.또한, 페이퍼 칩 방식은 트리불루스 테레스트리스 토탈 사포닌 결정에도 적용될 것으로 기대된다.

2.1초가시광선 분광광도계

자외선 분광광도법은 다음을 위한 가장 일반적인 방법입니다total tribulus saponins의 함량을 결정다.이 방법은 유색 물질 뿐만 아니라 공액 구조를 가진 무색 물질도 정확하게 측정할 수 있다 [9].Li Yan 등 10명은 기준물질로 Tribulus terrestris에서 단량체 saponin 성분을 사용하였고, 색시약은 E 시약과 황산의 에탄올 용액, 결정파장은 520 nm 이었으며, 그 결과 기준물질의 양과 0.06-0.2 mg 범위에서 흡광도 값 사이에 양호한 선형관계가 있음을 알 수 있었다.Li Ying 외.원산지에 따른 삼환나무의 품질 차이를 비교할 때, 삼환나무 열매 중의 총 사포닌 함량을 UV-Vis 분광광도계를 이용하여 확인하였다.기준으로 diosgenin 물질을 사용 하여, 색깔의 선택 현상액을 사용 하여을 탐구 했었HCIO ₄:vanillin (5%)로 4:1이다.그 결과 diosgenin 즐거운 선형 관계의 범위에서 7.52-150.4 μ g, 높은 복구 률을과 강 한 안정 성이다.

장평 등 12명은 자외선 분광광도법을 이용하여 다양한 기원으로부터 트리불루스의 총 사포닌 함량을 확인하였다.Tribulus terrestris 제어 물질로 사용 되었고, 그 결과는 좋았다는 것을 보여주 선형 관계의 범위에서 7.52-150.4 μ g.장 Sujun et al. [13 자외선 spectrophotometry 사용 기준으로 diosmin 물질과 색상을 탐지 310 nm의 파장 및 개발 업자의 HCIO ₄을 결정하는 총에 사포 닌 콘 텐 츠의 과일과 줄기와 잎 Tribulus terrestris 다른 수확 시기에 결과를 비교 하기 위해 서다.트리불루스 테레스트리스 (Tribulus terrestris) 줄기와 잎의 총 사포닌 함량은 열매보다 훨씬 높은 것으로 나타났으며, 줄기와 잎의 총 사포닌 함량은 7월에 가장 높은 것으로 나타났다.요컨대 자외선 분광광도법은 다른 분광분석법에 비해 장비 및 조작이 비교적 간단하고, 비용이 저렴하며, 분석속도가 빠르고, 민감도가 높다는 장점이 있어 사포닌 분석에 많이 사용된다.

고성능 액체 크로마토그래피 2.2

고성능 액체 크로마토그래피가 대중화되면서 점점 더 많은 사포닌 성분이이 방법을 사용하여 검출되고 있다.고성능 액체 크로마토그래피는 이동상으로 액체를 사용하며, 고압 주입펌프를 사용하여 단일 또는 혼합 용매, 버퍼 또는 기타 이동상을 이송하여 시료가 움직이게 하여 성분이 분리되도록 시험한다.매우 민감한 검출기는 이를 검출 가능한 신호로 전환하여 정성 및 정량 분석이 가능합니다.그 중 검출기는 실험실 환경과 사포닌 자체의 특성에 따라 판별할 필요가 있다.특징적인 자외선 흡수가 되지 않아 자외선 검출기를 사용하여 검출할 수 없는 디오게닌과 같은 일부 사포닌의 경우 광산란 검출기를 사용해야 한다.Li Haoyue et al. 114는 Tribulus terrestris의 품질을 제어하기 위해 colorimetry와 결합된 HPLC를 사용하였다.웰치 얼티밋 LP-Ci 8 컬럼은 이동상으로 메탄올:물 (80:20)을 사용하였다.Tribulus terrestris saponin을 검출하고 이를 지수로 사용하여 연구하였다.모두에서 그 결과 HPLC 방법과 colorimetric 방법, Tribulus 사포 닌 0.820 사이 좋은 선형 관계를 가지고 있고 7.380 μ g와 24.600 86.100 μ g,게의 평균 회수 율은 99.과 99.5%.이 방법은 간단하고 쉽게 수행할 수 있으며, 빠르며, 분리 효율이 높고, 감도가 높으며, 측정 결과가 정확하다는 특징이 있습니다.Tribulus 함량을 결정하는 데 적합하다.

모세관 전기영동 2.3

모세관 전기영동 (Capillary electrophoresis)은 이온이나 핵입자가 높은 전압의 전기장에 의해 구동되어 모세관 속에서 분리되는 액체 크로마토그래피 기술이다.그 중 고효율 모세관 전기영동은 널리 사용되고 있다.원료 약초의 분석이든 완제의약품의 분석이든 분리 및 분석에서의 독특한 장점으로 한약재 및 천연물의약품의 유효성분의 분리 및 정량결정에 어느 정도 진전이 있었다 [161].CE 기술의 인기가 증가함에 따라 실험 비용, 분리 효율, 분리 속도, 마이크로 정량 및 적응성 면에서 HPLC보다 우수합니다.분석효율이 높고, 주입량이 작으며, 조작이 간단하고, 분석비용이 저렴하며, 모세관 컬럼이 쉽게 오염되지 않는 장점이 있다.[171.이 방법은 천연약물의 활성성분의 함량을 분리, 결정하는데 널리 리용되고있다.그러나 현재 Tribulus terrestris의 총 사포닌을 검출하기 위해 capillary electrophoresis를 이용했다는 보고는 많지 않다.

2.4 종이칩 결정 방법

Paper chip microfluidic technology is a new type of microfluidic technology that is widely used in medical diagnosis, food safety testing, environmental monitoring and other fields due to its simple and fast processing, ease of use, and low cost. The basic principle is to form channels on the paper surface to guide the fluid I18]. Among them, forming channels on filter paper with hydrophobic materials is currently the most commonly used method, that is, drawing a hydrophilic-hydrophobic contrast map on the paper to create micron-scale capillary channels on the paper [19]. Solutions can be driven to specific areas by capillary force, so no external equipment is required. The commonly used detection methods mainly include photometric detection [201, fluorescence, electrochemiluminescence, and electrochemical detection methods, among which photometric detection is the most intuitive and commonly used method.

Wu Jian et al. [2 used a paper chip to detect the effective ingredient phloretin in Fructus Gardeniae and achieved satisfactory results. Hao Zhenxia et al. 1221 used a microfluidic paper chip to rapidly detect the content of tea polyphenols in order to eliminate the difference in color development time during the test. Using this method, different diluted tea samples were rapidly tested within 3 minutes of the start of the color development reaction, and the results obtained were in good agreement with the conventional method. According to a large number of literature reports, paper chip microfluidic technology, compared with the standard method, greatly shortens the time, does not require professional laboratory equipment, and can be used for on-site detection, which has certain practical application value. Therefore, paper chips can be used in the rapid analysis and detection of traditional Chinese medicine, and have broad application prospects. At present, there is no literature reporting the detection of tribulus terrestris total saponins, 그리고이 방법은 분석 결정에 있어서 프론티어 연구 분야가 될 수 있다.

결론 및 전망 3

A comparison of the advantages and disadvantages of the three methods for extracting tribulus terrestris total saponins can provide a reference for related researchers, who can choose the appropriate extraction method according to different needs. The ultraviolet spectrophotometry and high-phase liquid chromatography methods for testing tribulus terrestris total saponins have been widely used because of the advantages of their popular instruments and equipment and simple operation. Capillary electrophoresis and paper microfluidic technology are emerging separation and analysis techniques. Capillary electrophoresis has broad application prospects in the analysis of natural medicines, and significant progress has been made in this area. Paper microfluidic technology has been used in various fields of research due to its advantages of being fast and simple. With the development of science and technology, extraction methods and detection techniques will continue to improve and better serve the research and development of natural medicines and traditional Chinese medicine.

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