센텔라 식물의 활성 성분을 추출하는 방법은?
Centellaasiatica is the dried whole herb or whole herb 와roots 의the plant Centella asiatica(L.) Urb한(family Apiaceae). It is also known 로Luo De Da, Ben Da Wan 그리고Ban BianQian. It is widely distributed 에서the areas south 의the Yangtze River basin, 그리고the whole herb is used 에서medicine. It was first recorded 에서the Divine Husbandman's 마테리아의 고전이며 중간 등급의 약초로 분류된다.천성이 차갑고 맛이 쓰고 자극적이며 더위와 습기를 없애주고 해독과 부기를 줄이는 효과가 있다.임상적으로 타박상, 전염성 간염, 유행성 뇌척수 뇌막염 등을 치료하는 데 사용됩니다.
센텔라속 (Centella)은 세계적으로 20여종이 있는데 주로 북반구와 남반구의 열대와 아열대 지역에 분포되여있다.주로 남아프리카 · 인도 · 스리랑카 · 말레이시아 · 인도네시아 · 호주 등에서 생산되며, 일본에도 분포한다.중국에서는 센텔라 아시아티카 (Centella asiatica) 한 종만 생산되는데, 중국 동부, 중국 남부, 중국 중남부, 중국 남서부, 해발 2000 m 이하의 비옥하고 습기가 많은 도로변, 도랑, 밭, 초원 등에 널리 분포한다.센텔라 아시아티카는 대부분 트리테르페노이드 화합물로 구성되어 있으며, 그 중 아시아티코사이드 (asiaticoside)와 마데카소사이드 (madecassoside)는 풍부한 약리학적 활성과 다양한 임상 적용으로 인해 주요 활성 성분이다.현재 센텔라아시아티카 및 그 활성 성분에 대해 국내뿐만 아니라 국제적으로 광범위한 연구가 진행되고 있다.이 글은 최근 연구들을 고찰해 볼 수 있는 자료이다.
1 추출 및 정화
1.1 물 추출
Centella asiaticais rich 에서pentacyclic triterpenoids, such as asiaticoside and madecassoside. Asiaticoside and madecassoside are considered to have strong pharmacological activity and are used as indicators to evaluate the quality Centella의asiatica. Lu Maofang et 알다.used orthogonal experiments to optimize the extracti에process of Centella asiatica, 와the yield of asiaticosideas the evaluation index. 이results showed that the optimal conditions for the extraction process were as follows: 추출twice with water, the first time with 10 times the amount of water for 2 h, and the second time with 8 times the amount of water for 1.5 h. 5h. The optimal conditions for the purification process are: 0.4 mL/g chitosan, a 1.2:1 liquid concentration ratio, and a flocculation temperature of 70°C. This method saves raw materials, shortens working hours, reduces costs, and is conducive to industrial mass production. Kim WJ et 알다.[1] used subcritical water to extract asiatic acid and asiaticoside 에서Centella asiatica. Subcritical water is depressurized and cooled, and the subcritical water changes to water, which increases its polarity and reduces the solubility of asiatic acid and asiaticoside, causing them to precipitate from the solution. The particle size of the precipitated asiatic acid is larger than that of asiaticoside, and they can be separated by selecting an appropriate filter membrane based on the difference in particle size.
1.2 효소 추출
Han Wei et al. [2] used an enzymatic method to extract asiaticoside from Centella asiatica다.효소의 종류와 양, 센텔라아시아티카와 물의 물질대 용매비, 효소용액의 초기 pH, 효소온도, 효소시간 등을 알아본다.효소가수분리의 최적 공정변수는 직교실험설계를 이용하여 선정하였는데, cellulase 대 substrate의 질량비 (Centella asiatica) 1:50, 물질 대 액체비 (용매물에 대한 Centella asiatica의 질량비) 1:25, pH 6.0, 효소가수분해온도 40 °C, 효소가수분해시간 1.5 h. 기존의 추출방법에 비하여 효소추출이 빠르고 공정조건이 완만하며 수율이 높아 좋은 방법이다.활성 성분 본래의 특성을 유지하는 데 도움을 줄 뿐만 아니라 에너지 소비를 줄여줍니다.
1.3 정화 방법
준비 고성능 액체 크로마토그래피를 이용하여 센텔라 아시아티카 추출물로부터 아시아티코사이드 (asiaticoside)와 마데카소사이드 (madecassoside) 두 성분을 동시에 분리, 정제할 수 있으며, 순도는 98% 이상 [3]이다.Jia GT 등 4)은 컬럼포장재로 HPD100을 사용하였으며, asiaticoside와 madecassoside의 시료용액 농도는 각각 0.98, 1.85 mg/mL 이었다.흡착 및 용출 유속은 모두 2 BV/h 이었다.시료를 흡착시킨 후, 4 BV의 물로 세척한 후, 1 BV 부피의 50% 에탄올로 용출하였다.그 결과 마데카소사이드 함량은 3.9%에서 39.3%로, 아시아티코사이드 함량은 2.0%에서 21.5%로 증가하였다.
2분석 연구 (Analytical research)
2.1 질량분석
The triterpenoids asiaticoside그리고 madecassoside는 Centella asiatica의 주요 활성 성분이며, 이들의 결정에 HPLC 가 자주 사용됩니다.국내외 학자들에 의한 Centella asiatica품질 분석 연구 현황은 다음과 같다.
Zhang FL 등 [5]은 HPLC-ELSD 법을 물 (0.01% trifluoroacetic acid, v/v)의 이동상:acetonitrile (1.0% 메틸-트리-부틸-에테르, 0.01% 트리 플루오로 아세트산, v/v) (78:22)를 이동상으로, 유량 1.0 mL/min, 컬럼 온도 30 °C, 표류 튜브 온도 40 °C, 질소 압력 3.5 × 105 Pa이다.Centella asiatica의 asiaticoside, madecassoside 및 asiatic acid의 함량은 이동상 8:22), 유속 1.0 mL/min, 컬럼온도 30°C, 표류관온도 40°C, 질소 압력 3.5 × 105 Pa로 크로마토그래피 조건에서 동시에 검출되었다.팬 J et al. [6] 사용 디 텍 RP-HPLC 다이오드 배열 방법을 사용 하여 메탄올의 모 바 일 단계:물 (65:35, v/v)의 추가 β-cyclodextrin,의 탄소, hydroxysanguinarine 그리고 terminolic 산은이 pH 4에서 분리 및 결정 되었습니다.과 결의안은 증가 한 다는 것을 발견의 추가 β-cyclodextrin다.Rafaman-tanana M. H. 등 [7]은 HPLC-UV를 이용하여 Centella asiatica의 asiaticoside, madecassoside, asiatic acid 및 madecassic acid의 함량을 동시에 확인하였다.
트리테르페노이드 외에 플라보노이드도 센텔라아시아티카의 주요 활성 성분이다.Wang Rong 등은 control로 quercetin과 kaempferol을 각각 사용하였고, 320 nm의 자외선 분광광도법을 이용하여 Centella asiaticawhole herb의 총 플라보노이드를 확인하였다.이 방법은 조작이 간단하고 정확하며 민감도가 높고 재현성이 뛰어나 센텔라 아시아티카 전체 약초의 총 플라보노이드 함량을 확인할 수 있는 실용적인 방법이다.또한 Pamita B. et al. [9]은 Centella asiatica 메탄올 추출물의 두 가지 flavonoids인 apigenin과 rutin을 고성능 박층 광농도측정법을 이용하여 정량적으로 분석하였다.
2.2 In vivo 분석
Saponin 성분이 주성분이다센텔라아시아티카의 활성 성분다.그러나 장내 흡수가 어렵고 생물학적 이용성이 낮아 장내 거주 시간이 길고 장내 식물체와 상호작용해 원래의 형태처럼 생체 내에서 약리학적 활성을 보일 가능성은 낮다.웽준 (Weng Jun) [10] 등 연구진은 아시아티코사이드 (asiaticoside) 가 체외 및 체내에서 쥐의 장내세균에 미치는 대사 효과를 연구했다.그 결과 asiaticoside는 장에서 대사될 수 있으며, 대사는 glycosyl 그룹이 모두 아글리콘으로 전환될 때까지 하나씩 가수분해되는 단계적 방식으로 일어난다는 것을 알 수 있었다.Centella asiatica saponin과 대사산물이 혈액 순환에 들어가 약리학적 효과를 발휘하기 위해 함께 작용합니다.Huang Huaipeng [11] 등은 HPLC를 이용하여 centella asiatica saponin의 양을 알아보기 위해 쥐에서 생체 내 장내 관류 시험을 하였고, 약물의 농도와 흡수부위가 centella asiatica saponin의 흡수에 미치는 영향을 연구하였다.그 결과 일정 범위의 약물 농도는 centella asiatica saponin의 Ka와 Papp에 영향을 미치지 않았으며, 흡수 기전은 수동적 확산이다.소천정 등 12)은 자외선 검출이 가능한 pre-column 유도체화 RP-HPLC를 이용하여 비글개의 혈장 내 아시아산 함량을 정량적으로 분석하였다.P-toluidine은 분석 전에 시료를 유도하기 위해 사용되었으며, 결과는 정확했으며 아시아산의 약리학 연구에 사용될 수 있습니다.
3 약리학적 효과
3.1 항산화 효과
Centella asiatica has the function of regulating the activity of peroxidase and preventing oxidative stress. Its extract can not only regulate endogenous oxidative stress damage in the brain, but also regulate neurotoxic-induced oxidative stress. Subhasree B et al. [13] evaluated the 항 산화activity of Centella asiatica and speculated that the free radical scavenging function is the mode of action of Centella asiatica in the prevention and treatment of diseases such as arthritis, breast cancer, and atherosclerosis. Zainol MK et al. evaluated the antioxidant activity of the roots and 잎of Centella asiatica and the phenolic compounds named CA01, CA05, CA08 and CA11, and compared them with α-tocopherol(a natural antioxidant) and butylated hydroxytoluene (BHT, a synthetic antioxidant).
3.2 항염증 효과
Hydroxycentella asiatica의 높은 수준을 줄 일 수 있-2 표현과 라고 PGE2에서 콘 텐 츠의 부 드러 운 조직의 발목 관절 collagen-induced 관절염 (CIA) 쥐의 수준을 줄이고 염증 성 요인 TNF-α와 IL-6 혈장에 있다.그리고 IL-10의 수치를 증가시켜 madecassoside 가 CIA 쥐의 염증 반응을 효과적으로 억제할 수 있음을 나타낸다 [14].Liu Mei 등 15)은 CIA에 대한 마데카소사이드의 효과에 대한 연구에서 마데카소사이드가 CIA 쥐의 활액세포 증식을 억제하고 염증 세포의 침윤을 줄일 수 있다는 것을 발견했다.또한 마데카소사이드는 혈청 내 lgG 수치를 감소시키고, CIA 생쥐의 귀의 지연형 과민반응 및 cii 유도 림프구 증식 반응을 억제할 수 있다.이 결과는 madecassoside 가 CIA 생쥐에 상당한 보호 효과가 있음을 보여주며, 그 기전은 비정상적인 세포성 면역 반응을 조절하는 것과 관련이 있을 것으로 보인다.Madecassoside는 Centella asiatica의 고함량 성분 중 하나이며 류마티스 관절염 치료를위한 Centella asiatica의 주요 활성 성분으로 간주될 수 있습니다.
신경계에 미치는 영향 3.3
Centella asiatica 추출물 can affect the amyloid cascade in the hippocampus, alter the pathology of β-amyloid protein in the brains of PSAPP mice, and regulate the oxidative stress 반응that accompanies neurodegenerative changes in Alzheimer' s 질병이다.Mohandas Rao KG 등은 신선한 centella asiatica 잎 즙을 4 mL/KG의 용량으로 7일된 쥐에게 4~6주간 먹인 결과, 해마 CA3 부위의 apical dendritic spine과 secondary dendritic spine이 유의하게 증가하였음을 확인하였다.수지상가시 증가는 뉴런 간 연결 범위의 증가를 나타낼 뿐만 아니라 시냅스 후 전위를 증폭시키고 시냅스 효능을 조절하는 효과가 있다.따라서 수지상가시의 증가는 접촉점의 증가를 의미할 뿐만 아니라 더욱 중요한 것은 뉴런에 의한 많은 afferent 신호의 통합이 더욱 복잡해짐을 의미하기도 한다.센텔라 아시아티카 추출물은 공간 학습과 기억력을 향상시킬 수 있는데, 이는 해마 CA3 뉴런의 수지상분지를 증가시킴으로써 가능할 것으로 보인다.
Phospholipase A2 (PLA2)는 지질 대사에 관여하는 효소의 일종이다.뇌의 PLA2 활동이 증가하면 신호전달, 신경전달물질 합성 및 분비 등과 같은 뉴런의 특성을 변화시켜 조현병, 간질과 같은 질환을 유발할 수 있다.Centella asiatica 물 추출물은 칼슘 의존성이 없는 phospholipase A2 (iPLA2)와 cytosolic phospholipase A2 (cPLA2)에 대해 각각 97%와 77%의 효과적인 억제율을 나타내어 독성의 부작용을 거의 없이 효과적으로 뇌의 PLA2 활성을 감소시킬 수 있다.그것은 정신분열증, 간질, 파킨슨 &을 치료하는데 사용될 수있는 좋은 PLA2억제제입니다#39, s 병과 기타 질병 [16].
피부 시스템에 미치는 효과 3.4
센텔라아시아티카는 주요 성분이 상처 조직에서 콜라겐의 합성과 혈관 생성을 증진시켜 상처 치유를 촉진하기 때문에 많은 피부질환을 치료할 수 있다.아시아티코사이드와 마데카소사이드는 센텔라아시아티카의 주요 활성 성분이다.마데카소사이드는 염증세포의 침윤을 줄이고 진피섬모세포의 증식을 촉진하여 상피를 형성할수 있다.고용량 (12, 24 mg/kg) 에서는 화상 입은 피부 조직의 NO와 말론디알데하이드 (MDA)의 수치를 감소시키고 글루타치온 (GSH)과 하이드록시프롤린의 수치를 증가시킨다.또한, 센텔라 아시아티카 추출물은 체내 혈관 생성을 촉진할 수 있으며 체외에서 내피세포 성장을 촉진하여 상처 치유를 촉진하는 것으로 밝혀졌다 [17].낮은 용량의 asiaticoside (10-10 14 w) MCP-1의 표현을 높 일 수 있고 IL-1 β화상 입은 조직 대식 세포에서, 그렇게 함 으로써 피 기능 성장 인자라 혈관의 생산을 자극하는 (VEGF), 상처 치유 혈관 형성을 가속 화하는 피부를 불 태 웠과 홍보 [18].Haftek 등은 0의 조합을 발견하였다.1%의 마데카소사이드와 5%의 비타민 C는 피부 노화를 효과적으로 개선할 수 있다.
Ermertcan et al. [19]은 콜라게나제 군과 비교하여,로 처리한 군을 발견했다Centella asiatica 추출물은 면역 반응성이 더 강했다질소 산화물 synthase inducible (iNOS) 및 변환 성장 인자 β (TGF-β), 하지만 약 immunoreactivity laminin 및 fibronectin, 그래서의 초기 단계에 있는 상처 치유, 콜라 연고는보다 더 효과적인 것은 Centella asiatica 추출.
3.5 그 밖의 효과
Hydroxy asiaticoside는 미리토끼 혈청내 CRP 상승 정도와 MDA 함량을 현저히 감소시키고, SOD 활성을 증가시키며, 동시에 Bcl-2단백질 발현을 상향조절함으로써 심근세포 사멸을 억제할 수 있다.madecassoside의 항 심근경색 효과는 항염증 활성, 항산화 활성, Bcl-2발현 상향 유도, 심근 세포 사멸 억제와 관련이 있을 수 있다 [20].
Centella asiatica 추출물은 인간 림프구에서 cyproterone acetate (CPA)에 의해 유발되는 독성 손상을 줄일 수 있습니다.연구결과 centella asiatica 추출물은 염색체 돌연변이율과 자매 색소 교환율을 현저히 감소시켜 CPA의 독성을 감소시킬 수 있는 것으로 밝혀졌다.
Centella asiatica acid has a neuroprotective effect on mice with persistent cerebral ischemia, can reduce blood-brain barrier permeability, and reduce mitochondrial damage. It is a good candidate drug for the treatment of cerebral ischemia.
동물의 효모 다당류에 의해 유도된 급성 관절염 모델을 이용한 연구는 Centella asiatica 가 용량 의존적으로 PG 방출을 억제하고 NO 생성을 줄일 수 있다는 것을 발견했다.이는 염증세포 침윤과 관절 부종을 감소시킬 뿐만 아니라 연골 분해 [21]도 억제한다.
또한, Centella asiatica는 항균, 항 궤양, 항 정맥 부족, 항 신장 간질 섬유증 및 기타 효과도 있습니다.이러한 풍부한 약리학적 활동은 센텔라 아시아티카 (Centella asiatica)와 그 활성 단omeric 성분을 개발 및 응용에 대한 광범위한 전망을 갖게 합니다.
참조:
김완주 (Wan Joo Kim), 김재훈 (Jaehoon Kim), 밤방 베리안시아 (Bambang Veriansyah) 센텔라 아시아티카 (Centella asiatica)에서 추출한 생리 활성 성분 중 subcritical을 이용한 Extrac 물 [J]다. 저널은 의 초임 계 유체,2009,48:211- 216.
[2] 한위, 천후단, 판량 등이 있다.아시아티코사이드 [J] 효소 추출.난징공과대학 논문집:자연과학편, 2009, 31 (3):18-22.
[3] 가오밍제, 위안샤오옌, 샤오홍빈.Centella asiatica 추출물로부터 asiaticoside와 madecassoside의 분리 및 정제를 위한 고성능 액체크로마토그래피법의 제조 (J.크로마토그래피, 2008, 26(3):362-365.
[4] 지아광타오, 루슈양. made의 농축과 정화-cassoside and asiaticoside from Centella asiatica 추출 with macroporous 송진다 [J다] 저널 of 색 층 분석법 A,2008, 1193:136-141.
[5] 장 Fenglun,Wei Yingjie, 외 al. 동시 정량 에 의해 Centella asiatica 추출물에서 3가지 주요 triterpenoid glycosides 증발광 스캐터링 검출이 가능한 고성능 액체 크로마토그래피 [J. Biomed Chromatogr,2008,22:119-124.
[6] 판잔, 개기청 등이 있다. High Perform-ance를 이용한 Centella asiatica의 Ma-decassic Acid인 추출물의 분리 및 결정 액체 색 층 분석법 with β - Cyclodextrin as 모 바 일 단계 첨가물다 [J다] 턱 J 크로마토그르,2007,25 (3):316 - 318.
[7] M. H. Rafamantanana, E. Rozet, G.E. Raoelison 외. 에 대한 im-증명된 HPLC-UV 방법 동시 물량 triterpenic glycosides와 aglycones in leaves of Centella asiatica (l)Urb (APIACEAE) [J]이다. J 크로마토그르 B. 2009년, 03,018.
[8] Wang Rong, Li Yunxiang, Cai Lingyun, 외.Centella asiatica total flavonoids의 추출공정 및 함량 결정에 관한 연구 (J.Spectroscopy Laboratory, 2009, 26(3):544-549.
[9] 파미타 반다리, 네라지 쿠마, 아자이 P. 굽타, et al. 신속 한 동시 측정을 위한 RP-HPTLC 농도측정법 중요한 약용 식물의 주요 플라보노이드의 [J]. Short Com-munication,2007,30:2092-2096.
[10] 웽준, Lv 큐준, 티안잉 외.장내 식물체에 의한 asiaticoside의 대사 변화 (J.한방의학, 2006, 37 (7):1008-1011.
[11] 황휘풍, 류카이하.쥐에서 asiaticoside의 생체내 장흡수동태 (J.한방의학, 2008, 39(7):1056-1058.
[12] 정샤오춘, 왕성하오 등. Centella asi-atica 추출물을 precolumn derivatization RP-HPLC[J]에 의해 경구 투여한 후 비글개 혈장의 아시아산 측정. 저널 크로마토그래피 B 중에서,2009,877:477-481.
[13] B. Subhasree,R. Baskaret, R. Laxmi Keerthana, 외. Evalua러 졌 of antioxidant 잠재적인 in 선택 한 녹색 잎이 무성 한 야채 [J]다. 식품화학,2009,01,029.
[14] 이홍종, 공하, 장리 등. Madecassosideatten-uates니다 염증 성 response on 콜라겐-유도 관절염 in DBA/1 생쥐 [J. 2008년 Phytomedicine, 11,002다.
[15] 류메이, 다이위, 야오서우후안.et al. 마데카소사이드가 type II collgen-induced arthritis에 미치는 항류마티스 관절염 효과 (J. International Immunopharmacology,2008,8:1561-1566.
[16] 바르보사 N. R., 피텔라 F., 가타즈 W. F. 외. Centella asiatica 물 추출물은 rat cerebel-lum [J]에서 iPLA2 및 cPLA2 활성을 억제한다. Phytomedicine,2008,15:896-900.
[17] 류메이, 다이유, 리잉 외. Centella asiatica 허브에서 분리한 Madecassoside는 생쥐의 화상 상처 치유를 촉진한다 [J. Planta Med,2008,74:809-815.
[18]. Yoshiyuki 기무라, Maho 스미요시,Kei-이치 Samukawa,et al. 화상 상처에 낮은 용량에서 asiaticoside의 촉진 작용 수리와 그 메커니즘 [J. European Journal of Pharmacolo-gy,2008,584:415-423.
[19] Ermertcan,Inan,Ozturkcan 등이 있다. collagenase의 효과 비교 and extract ofCentella asiatica in an 실험적 상처치유의 모델:면역조직화학적 및 histopatho-논리적 연구 (J). 상처 수리 및 재생,2008,16:674-681.
[20] Bian Guangxing, Li Guigui, 양 윤, et al. Madecassoside Rat[J]에서 지역 허혈에 대한 허혈-재관류 손상을 감소시킨다. BiolPharm Bull,2008,31 (3):458-463.
[21] 하르토그 A, 스미트 HF, 반데르 크라안 PM 외. 표준화된 Centella asiatica fraction에 의한 In vitro 및 In vivo의 연골분해 조절 (J. 지수 평 Biol 의대 (Maywood),2009,234 (6):617-623.