연구논문:센텔라 아시아atica Triterpenes에 관한 연구 (Study on Centella Asiatica Triterpenes

Centellaasiatica(L.) Urb. 은also known as centell한asiatica, horseshoe plant, horseshoe plant, etc. It is 한perennial plant 에서이가족Apiaceae. Its dried whole herb is used 에서medicine 그리고has 이효과의clearing away heat 그리고dampness, detoxifying 그리고reducing swelling. It is widely distributed 에서China, mainly concentrated 에서이are한south 의이Yangtze River[1]. Centellaasiaticais rich 에서chemical components such as triterpenoids, flavonoids, polyacetylenes, 그리고essential oils. Among these, triterpenoidcomponents such as 아시아acid, madecassic acid, asiaticoside, 그리고madecassoside 은considered 을be its ma에서bioactive substances (Figure 1). They have neuroprotective, wound-healing, anti-inflammatory, antioxidant, anti-aging, anti-allergic effects, 그리고are widely used 에서the treatment 의피부diseases such as 피부burns, ulcers, psoriasis, 그리고scleroderma, as well as in the beauty industry 을acne removal, soothing, freckle removal 그리고whitening, 그리고노화 방지[2-4]. Therefore, centellaasiaticais widely used in the preparation 의pharmaceutical 그리고cosmetic additives 그리고is 한important wild plant resource.

이triterpenoid components asiaticoside and madecassoside are the marker components 의Centellaasiaticain the 2020 edition 의the Chinese Pharmacopoeia, and their total content is required to be not less than 0.8% [5]. 이content 의the above compounds varies greatly in Centellaasiatica에서different origins and harvest periods[6], resulting in unstable quality 의Centellaasiaticaplant resources. 에서addition, due to the unlimited harvesting 의Centellaasiaticawild resources, coupled 와the limitations 의artificial cultivation conditions and resources, as well as the low 추출efficiency 의triterpenoid saponinssuch as asiaticoside and madecassoside and the complexity 의their chemical 구조,the current 생산level still cannot meetthe global marketdemand 을Centellaasiaticatriterpenoid components, limiting their application in the food, pharmaceutical, and cosmetic industries [7-8].

합성 생물학과 생합성 경로의 이형 재건은 복잡한 천연 식물 생성물의 문제를 해결하는 데 효과적인 전략입니다.연구자들은 합성생물학을 이용하여 센텔라 아시아티카 (Centellaasiatica), QS-21 백신 보조제, 소야사포닌 (soyasaponinA), 마리골드 글리코사이드 (marigold glycoside E), 진세노사이드 (ginsenosides) 및 기타 트리테르페노이드 사포닌 (triterpenoid saponins)에서 사포나리오사이드 B를 얻는 데 성공했다 [9-12].따라서 본 연구에서는 (영어) Centellaasiatica triterpenoids의 생합성 경로와 그 대사경로에 있는 주요 유전자들을 체계적으로 정리하고, 상기 Centellaasiaticatriterpenoids의 대사조절 및 이형 생합성의 경과 및 전망을 분석하여, Centella asiatica triterpenoids의 생합성, 산업생산 및 기능성 제품 개발과 관련된 연구를 더욱 촉진하고자 하였다.

1 Centella asiatica triterpenoid saponins 및 이들의 약리학적 활성

트리테르페노이드 사포닌은 하나 이상의 당모이어티나 다른 그룹이 붙어있는 [13] 6개의 아이소프렌 단위 (C5H8)의 트리테르페노이드 골격을 가진 천연 화합물이다.Centella asiatica's 트리테르페노이드는 그것의 주요 활성 성분이다.현재까지 센텔라 아시아티카로부터 40개 이상의 트리테르페노이드 화합물이 성공적으로 분리되고 구조적으로 확인되었다.이러한 화합물은 주로 요산형 (ursane-type)과 올레아난형 (oleanane-type) [14]으로 분류된다.트리테르페노이드 사포닌은 아글리콘과 글리코사이드를 함유하고 있다.센텔라아시아티카에 있는 아글리콘은 주로 아시아산, 마데아스카르산, 아르주놀산, 테르놀산, 마다시아산, lsothankunic acid, 이소아시아산 등이 있다 [14].트리테르펜 사포닌에서 아글리콘의 C-28에 있는 히드록시기는 보통 에스테르 결합을 통해 다양한 구조를 가진 당화사슬과 연결되어 에스테르 글리코사이드 [15]를 형성한다.

The highest content is asiaticoside, madecassoside, and asiaticoside B (asiaticoside B), which can account for 80% or more 의the total asiaticoside content [16]. Centella asiatica 산and hydroxycentella asiatica acid are ursane-type triterpenesaponins. The C-28 position is linked to a single glucose to form the monosaccharide glycoside quadranoside Ⅳ and centelloside C. The C-28 position is linked to glucose-glucose to form the disaccharide asiaticoside E and centellasaponin B,and C-28-linked glucose-glucose-rhamnose as trisaccharides asiaticoside and asiaticoside E. Arjunolic acid and arjunic acid are oleanane-type triterpene saponins. The C-28-linked single glucose (arjunoglucosideII, chebuloside Ⅱ), disaccharide (asterbatanoside B, centelloside D), and glucose-glucose-rhamnose chain (scheffoleoside 한,asiaticoside B) are the corresponding monosaccharide, disaccharide, and trisaccharide isomers of asiatic acid and madecassic acid, respectively. There are a large number of isomers of ursaneand oleanane structure isomers in asiatic acid, which have very similar physical and chemical properties. It is difficult to separate the isomers using common chromatographic conditions.

그러므로, 연구원들은 대개 특정의 농도를 추가 β-cyclodextrin (β-CD) 또는 γ-cyclodextrin (γ-CD)을 모 바 일 한 단계이다.겉은 친수성 (hydrophilic) 이고 안쪽은 지방성 (lipophilic)인 특성을 이용하여 이성질체가 그 안에 박히고, 포함복합체 (inclusion complexation) 가 서로 다른 steric 방해물을 유발함으로써 이성질체를 다른 유지시간으로 분리할 수 있게 한다 [17~19].또한, 펜타시클리크 트리테르펜 및 이들의 글리코사이드 이외에도 테트라사이클리크 트리테르펜 사포닌, 예를 들면 노토긴세노사이드 SFt3, 노토긴세노사이드 SFt4, 담마라네계 테트라사이클리크 트리테르펜 사포닌 [20-21] 등이 있다.저자는 센텔라 아시아티카의 트리테르페노이드 성분을 CAS 번호 및 관련 문헌으로 요약했다 (표 1). 구조 공식은 SCI 파인더 (https://scifinder-n.cas.org/)에서 얻을 수 있다.

The rich triterpene saponin content of Centella asiatica항 신경 퇴행성, 항 우울제 및 항 불안, 항 간질 등과 같은 광범위한 약리학적 활동을 주며, 대사 질환, 호흡기 질환, 소화기 질환 등의 치료에 좋은 효과가 있으며, 특히 피부 관련 질환 [2]의 치료에 좋습니다.센텔라 아시아티카 추출물 및 그 트리테르펜은 여드름, 대머리, 백반증, 아토피 피부염, 상처 치유, 흉터 회복 등에 일정한 치료 및 완화 효과가 있다 [22].연구인원들은 centella asiatica 추출물에 들어있는 asiatic acid, madecassic acid, asiaticoside, madecassoside는 일정한 경피흡수능력이 있으며 독성이 없다는 것을 발견했다.피부병 [22]을 치료하기 위한 각종 준비물에 첨가되었다.센텔라 아시아티카 (Centella asiatica) 추출물과 전기방사 젤라틴 (electrospun gelatin) 막이 함유된 하이드로젤은 섬모세포의 증식과 콜라겐 합성에 영향을 미침으로써 상처 치유를 촉진하며, 미처리 제형보다 빠른 상처 치유속도를 보여준다 [23~24].

아시아 산성를 크게 줄 일 수 있는 염증 반응 같은 요소들의 표현 TNF-a과 IL-1 β, 뿐만 아니라 지역과 같은 요소들을 면역 반응을의 표현)에, 억제 hyperkeratinization, 돛대 셀과 염증 성 셀 침투 [25];hydroxycentella asiatica acid는 친염증성 사이토카인 IL-1b와 TLR2의 발현을 감소시키고, HaCaT 각질세포에 의한 AQP3, LOR,IVL의 분비와 인간 피부 섬모세포에 의한 히알루론산의 분비를 촉진시켜 아토피 피부염에 대한 큰 치료 가능성을 보여준다 [26].Centella asiatica 추출물은 피부 노화 방지, 산화 방지, 피부 장벽 수분 개선에 상당한 효과가 있습니다.또 피부 색소 침착을 줄이고 피부 활력을 증진시킨다.각종 피부 관리 제품이나 미용 제품에 첨가되어 시장 전망이 크다 [27].

지 앙 H etal다. [28] 할 수 있 다는 것을 확인 asiaticoside 유의하게 말하 ROS을 억제 하여 피부의 대하 며 TGF-1/을 위한 뉴딜정책 Smad 신호 β 천천히 말하다.센텔라아시아티카 추출물 (Centella asiatica extract)은 세포 활력 증진, 텔로미어 길이 안정, 당화 물질 축적 억제 [29]를 통해 피부 노화를 효과적으로 퇴치할 수 있다.히드록시아시아티코사이드는 아쿠아포린 3의 발현과 히알루론산 분비를 증진시켜 피부 수분 공급을 효과적으로 개선할 수 있다 [26].게다가,Centella asiatica complex extract effectively reduces skin damage and pigmentation, and shows brightening and regenerating effects. Centella asiatica saponin significantly increased superoxide dismutase activity and vascular endothelial growth factor expression in rat experiments, optimizing microcirculation, enhancing skin vitality, and inhibiting tyrosinase mRN한translation and MITF binding to DN한,reducing melanin 생산and tyrosinase gene expression, effectively combating pigmentation. In short, the above studies have highlighted the medical and cosmetic application 잠재적인of Centella asiatica extract in skin protection and repair.

센텔라아시아티카 (Centella asiatica)에 트리테르펜 사포닌 축적 2

식물에 축적된 2차 대사산물은 자신의 성장에 필요한 물질일 뿐만 아니라 병원체의 공격이나 환경 스트레스에 대한 식물 방어체계의 중요한 부분이다.이들의 중요한 생물학적 활성으로 인해 점점 더 많은 식물의 2차 대사산물이 발견되고 의약품 성분 및 식품 첨가물로 사용되고 있다.축적과정은 유전, 개인차, 환경요인, 수확시기 등과 같은 다양한 요인에 의해 상당한 영향을 받는다.다른 시기에 수확된 센텔라 아시아티카 (Centella asiatica)의 아시아티코사이드 (asiaticoside)와 마데카소사이드 (madecassoside)의 함량은 매우 다양하다.Liu Xiaoqi 등 [72]이 연중 12개월에 수확한 Centella asiatica를 분석한 결과 7월부터 9월까지 수확한 Centella asiatica의 잎에 함유된 건물질 함량, 잎 함량 및 asiaticoside와 madecassoside의 함량이 연중 유의적으로 높았으며, 3월부터 5월까지 수확한 총량이 11월부터 1월까지 수확한 총량보다 유의적으로 높았다.

Wan Lingyun 등)이 10일, 20일, 30일, 40일 숙성시킨 Centella asiatica 잎의 조성에 대해 연구한 결과, 성장 단계에 따라 유의한 차이를 보이는 14개의 triterpene saponins을 검출하였다.한샤오양 등은 센텔라 아시아티카 (Centella asiatica)의 뿌리, 줄기, 잎에서 아시아티코사이드 (asiaticoside)와 마데카소사이드 (madecassoside)의 함량을 발견했다.그 결과이 두 화합물의 부위별 축적량은 비슷하였으며, 잎에서 가장 많은 함량을 보였고, 그 다음이 줄기, 뿌리로 나타났다.또한 마데카소사이드보다 아시아티코사이드의 함량이 다른 부분에서 약간 높은 것으로 밝혀졌다 [74].Centella asiatica 뿌리, 줄기 및 잎의 부위별 대사체 분석에서 잎의 asiaticoside의 함량은 줄기에서 유의적으로 높았고, 줄기 다음으로 높았으며, 뿌리 [75]에서 가장 낮았다.

다양한 기원의 센텔라 아시아티카 (Centella asiatica)에 함유된 활성 성분 (아스파트산, 히드록시아스파트산 및 그 사포닌)의 함량은 매우 다양하다 [76].인도에서 온 Centella asiatica의 전체 식물 시료에 대한 연구에서, 대부분의 시료의 평균 asiaticoside 함량은 약 3 mg·mL-1 DW, hydroxyasiaticoside 함량은 15-20 mg·mL-1, 총 triterpenoid 함량은 약 30 mg·mL-1 DW [77] 이었다.말레이시아의 Centella asiatica를 시험한 결과 잎의 triterpenoids 함량이 가장 높은 것으로 나타났으며, 질량분율은 asiaticoside 가 11.5 mg·mL-1 DW, madecassoside 가 16.5 mg·mL-1 DW [76]로 나타났다.

태국의 센텔라 아시아티카 (Centella asiatica) 전초 중 펜타시클리크 트리테르펜 함량은 재배지 및 수확 기간에 따라 다르며, 가장 높은 총 펜타시클리크 트리테르펜 함량은 37.2 mg·mL-1 DW이다 [15].아시아티코사이드 (asiaticoside)의 함량과 이들의 아글리콘 (aglycones)을 조사한 연구이다.위의 4가지 펜타시클리크 트리테르페노이드는 잎에 많이 축적되어 거의 글리코사이드 (glycosides)의 형태로 존재한다는 것이 밝혀졌다 [10].이와 동시에, 태국 Trang, Songkhla, Phatthalung, Nakornsrithammarat, Ratchaburi 및 기타 장소에서 3월, 7월 및 12월에 수집한 Centella asiatica에서 상기 4가지 성분의 함량이 검출되었다.수확 장소와 수확 시기에 따라 당질과 아글리콘의 비율이 크게 달라지는 것으로 밝혀졌다 [10].빛은 식물의 2차 대사산물의 축적에 영향을 미치는 주요 환경인자의 하나이다.황양펜 등 (78)은 센텔라아시아티카 (Centella asiatica)의 생장과 아시아티코사이드 (asiaticoside) 및 마데카소사이드 (madecassoside)의 함량에 미치는 다양한 LED광질의 영향을 연구하였다.그들은 적색광 배양이 Centella asiatica의 생장과 총 asiaticoside 생산의 축적에 이로우며, 적색광 및 청색광 (7:3)은 asiaticoside 및 madecassoside 함량의 형성과 축적에 이로운것을 발견하였다.

근원과 수확시기, 재배조건에 따라 얻어지는 센텔라 아시아티카 (Centella asiatica)의 트리테르페노이드 사포닌의 함량은 크게 다르지만 이들 화합물은 잎에서 가장 높고, 그 다음으로 줄기에서 많이 함유되어 있으며, 식물 전체의 뿌리에서는 매우 낮은 함량을 나타내어 이전의 연구 결과와 거의 같은 결과를 보여 센텔라 아시아티카 (Centella asiatica)의 트리테르페노이드 사포닌이 잎에 구체적으로 합성되어 축적되는 경향이 있음을 알 수 있었다,약용 부분과도 일치하는 것.또한, 이러한 인자들은 Centella asiatica의 triterpene saponins과 glycoside의 함유 비율에도 영향을 주어 Centella asiatica 추출물의 효능에 영향을 줄 수 있는데, asiatic acid와 madecassoside는 항염증 활성이 높고 [79], asiaticoside와 madecassoside는 상처 치료 활성이 좋기 때문이다.

아시아티코사이드 트리테르페노이드 사포닌의 생합성 경로 3

센텔라아시아티카 (Centella asiatica)에 들어있는 트리테르페노이드 사포닌 (triterpenoid saponins)은 우산신 (ursane)과 올레아네인 사포닌 (oleanane saponins)으로 나뉜다 [7].Asiaticoside와 madecassoside는 우산성 트리테르페노이드 사포닌 구조형에 속한다.트리테르페노이드 성분의 전구체인 파르네실피로인산염 (FPP)은 주로 메발로네이트 경로 (MVA)에서 유래되며, 메틸에리트리톨 인산염 경로 (MEP)에서 유래되는 비율은 적다 [81].FPP는 주로 메발로네이트 경로 (MVA)에서, 적은 정도로는 methylerythritol 인산염 경로 (MEP)에서 유래된다 [81-82].스쿠알렌 FPP에 의해 촉발시는 synthetase 스쿠알렌 (SQS)를 형성 하기 위해, 스쿠알렌로 전환 되는 epoxidase (SQE)을 2, 3-oxidosqualene, 그리고 마침내에 의해 cyclized oxidosqualene cyclases (OSC)를 형성 α-amyrin와 β-amyrin [83-85];α-amyrin와 β-amyrin은 연속적으로 산화 된 그때에 의해 C-28 P450 CYP716A83/CYP716A86를 양식하는 효소를 ursolic 산성 ursolic 산성 그리고 oleanolic 산은 해골, 각각 [86].

Ursolic acid는 CYP714E19 및 CYP716C11에 의해 C-2 및 C-23위치에서 히드록실화되어 centelloside를 형성하고, 다시 CYP714E41에 의해 C-6위치에서 히드록실화되어 hydroxyl centelloside를 형성한다 [86-87].산과 산 madecassic은 아시아 glycosylated에 의해 C-28 UGT73AD1 UGT73AH1 또는 형태에 해당하는 아시아 산으로 UGT1 monoglucoside (2 α, 3 β, 23 α-trihydroxyurs-12-ene-28-oic acid-28-O-β-D-glucopyranoside) 그리고 hydroxymatric 산은 monoglucoside (madecassic 산성 monoglucoside, α 2, 3, β, 6 β, 23 α-tetrahydroxyurs-12-ene-28-oic acid-28-O-β-D-glucopyranoside) [88-90] (그림 2).

최근 장난 (江南) 대학 저우징원 (周靖文) 교수팀은 센텔라 아시아티카 (Centella asiatica)의 뿌리, 줄기, 잎 등 여러 부위를 전사해 분석해 후보 UGTs의 발현을 얻었다.체외 효소 반응과 결합 된, 그들은 상영 되고 아시아 산성 diglucosides 얻 (2 α, 3 β, 23 α-trihydroxyurs-12-ene-28-oic acid-28-O-β-D-glucopyranoyl (1 → 6) 가 될-β-D-glucopyranoside) glucosyltransferases (CaUGT73C7 CaUGT73C8)과 rhamnosyltransferases (CaRRT1~5)을 생산하는 아시아 산성 diglucosides과 아시아 산성, asiaticoside의 생합성 경로를 처음을 설명 할이었[91].

그 직후 asiaticoside 전사체 데이터를 기반으로 Centella asiatica에서 asiaticoside와 madecassoside 가 축적되는 공간적 특이성을 이용하여 co-expression analysis를 이용하여 asiaticoside와 madecassoside의 특징적인 C-28 glycosyl chain의 합성에 관여하는 CaUGT3와 CaUGT4를 성공적으로 규명하였다.CaUGT3 하중에서 두 번 째 특성 glycosyl 사슬의 포도당 1 → 6 연결 한 방법으로, 킨 듯 그들의 monosaccharide glycosides은 위산 madecassic diglucosides 그리고 hydroxymadecassic 산은 diglucosides (madecassic 산성 diglucosides, α 2, 3, β, 6 β, 23 α-tetrahydroxyurs-12-ene-28-oic acid-28-O-β-D-glucopyranoyl (1 → 6) 가 될-β-D-glucopyranoside), 그리고 세 번 째 rhamnose 특성의 설탕과 체인 asiaticoside를 형성 하기 위해 추가 되었madecassoside CaUGT4의 행동에 with 1 →4 연결이다.

연구팀은 단백질 구조 예측, 분자 도킹, 그리고 site-directed mutagenesis 실험을 통해 당 공여체의 C-5 그룹을 고정시키는 역할을 하는 인접한 두 아미노산이 CaUGT3와 CaUGT4의 당질 공여체 선택성에 필수적이라는 것을 발견하였다 [74].위의 두 연구는 아스페룰로시드산과 마데카소사이드의 생합성 경로를 완전히 해명하여 아스페룰로시드산과 마데카소사이드의 생합성 경로 해명의 공백을 메웠고, 이후 합성생물학을 이용한 이들 귀중한 트리테르페노이드의 체외 합성에 기초를 마련했다.

또한 올레아놀산은 CYP714E19 및 CYP716C11에 의해 C-2 및 C-23위치에서 히드록실화되어 아르주놀산을 생성할 수 있다.최근 보고서에서, 인도의 연구원들은 아르주놀산의 생합성 경로를 발견했습니다.CYP716A233 및 CYP716A432 3 연속 수행의 oxidations β-damascenol oleanolic 산을 생성, 그리고 CYP716C88 수행 CYP716C89 C2-position hydroxylation, 그리고 CYP714E107a CYP714E107b 수행 C23-position hydroxylation arjunolic 산성 [92]를 생성 할 수 있습니다.이 구조로 볼 때, ajmalic acid는 CYP714E41에 의해 C-6위치에서 hydroxylation 되어 terminolic acid를 형성할 가능성이 높다고 추측된다.우르솔산 (ursolic acid)과 올레아놀산 (oleanolic acid)의 구조는 C-19와 C-20의 메틸 위치에서만 차이가 있을 뿐 매우 유사하므로, 이들이 어떤 공통적인 생물학적 촉매작용을 할 것으로 추측된다.Centella asiatica에서 분리한 Scheffoleoside A와 asiaticoside B는 각각 ajugolic acid와 terminolic acid를 기반으로 하며, C-28위치에서 독특한 글루코스-글루코스-램코 사슬이 연결되어 asiaticoside와 madecassoside의 구조와 유사하다.

glycosyltransferases의 문란 한 기질의 특성으로 인해, 그것의 구조적 정보 로부터 추론 할 수 있는 것과 고립 정보를 Centella asiatica 화합물 arjunolic 산성 그리고 arjunic 산은 UGT73AD1/UGT73AH1/에 의해 촉발시 될 수 있을 형성 하기 위해 UGT1 arjunoglucoside (Ⅱ,  2 α, 3 β, 23-trihydroxyolean-12-en-28-oic acid-28-O-β-D-glucopyranoside), chebuloside Ⅱ, α 2개, 3 β, 6 β, 23-tetrahydroxyolean-12-en-28-이슬람제국 acid-28-O-β-D-glucopyranoside),포도당을 한 후 두 번 째 그룹은에서 추가 C-28 CaUGT73C7/CaUGT73C8/제 위치를 형성 하기 위해 CaUGT3 asterbatanoside B (2 α, 3 β, 23-Trihydroxyolean-12-en-28-oic acid-28-O-β-D-glucopyranoyl (1 → 6) 가 될-β-D-glucopyranoside)과 centelloside D(α 2, 3 β, 6 β, 23-tetrahydroxyolean-12-en-28-oic acid-28-O-β-D-glucopyranoyl (1 →에 의해 촉발시 rhamnosyltransferase CaRRT1~5/CaUGT4 해당 trisaccharides를 생산 scheffoleoside a와 B asiaticoside 추정 되는 경로를 아직도 더 할 필요 가 있ajmalic acid와 ajmalic acid에서 scheffoleoside A와 asiaticoside B로 가는 생합성 경로를 증명하기 위해 실험적으로 검증하였다.

asiaticoside 및 heterologous biosynthesis의 생합성 과정 규정 4

환경의 복잡성과 지리적 제약으로 인해 원초의 직접 추출에 의존하는 전통적인 방법은 산업적 규모에서 상당한 한계에 부딪혀 왔다.특히 야생 센텔라 아시아티카 (Centella asiatica) 집단은 습한 지역에서 자라는 것을 선호하며, 이러한 지역은 중금속 오염과 기타 유해 화학물질의 위협을 받는 경우가 많아 과도한 중금속과 미생물 함량으로 인해 야생 시료를 사용하기 어려울 수 있다 [93].더군다나 센텔라 아시아티카 &의 규모도 아니다#39;의 인공재배나 그 야생자원매장량으로는 제약, 일용화학 및 기타 공업의 늘어나는 수요를 충족시킬수 없다.이런 점을 감안해 체외배양기술이 혁신적이고 잠재적으로 강력한 대안으로 떠올랐다.안정적이고 균일한 환경에서 대규모 고품질 방식으로 센텔라아시아티카 (Centella asiatica)를 배양할 수 있으며, 이를 통해 필요한 2차 대사산물을 효율적으로 생산하고 센텔라아시아티카 자원을 얻을 수 있는 새로운 방법을 열 수 있다 [94-95].

체외배양 기술로는 캘러스 배양, 모근 배양, 현수세포 배양 등이 있다.이들은 양질의 센텔라아시아티카 생식을 보존할 수 있을 뿐만 아니라 이를 대량으로 증폭하여 전파하거나 [96] 목표물인 트리테르페노이드 사포닌을 얻기 위한 생물반응기로 사용될 수 있다.PRASAD 한등 [97]은 Cu2+, NH4+-N:NO3--N등을 첨가하여 체외에서 증식된 Centella asiatica shoots을 얻었는데, 아시아티코사이드의 물질분율이 5.3 mg·mL-1 DW에서 8.9 mg·mL-1 DW로 증가하였다.또한, 연구진은 수크로스 농도 (7.2 mg·mL-1 DW)를 조절함으로써 아시아티코사이드 함량도 증가시킬 수 있음을 발견했다.GANDI S 등 [98]은 아시아산 캘러스를 이용하여 (1.46±0.06) mg·mL-1 FW 아시아산을 제조하였다.센텔라 아시아티카 (Centella asiatica)의 남아프리카산 원료로부터 유도된 캘러스와 현지 세포에는 트리테르펜 사포닌이 풍부하여, 1.5-2.5 mg·mL-1 DW의 질량분율을 갖는 아시아산, 1.5-3 mg·mL-1 DW의 마데아스기산, 14-29 mg·mL-1 DW의 아시아티코사이드, 13-28.4 mg·mL-1 DW의 마데카소사이드 [99] 등이 있다.

5 L 바이오반응기에서 배양된 센텔라아시아티카의 현수세포는 최적의 배양조건 [100]에서 최대 60.08 mg·mL-1 DW 마데카소사이드를 생산할 수 있다.털뿌리 배양은 발효기에서 재배할 수 있으며 일반적으로 대사공학에서 사용되며 2차 대사산물을 생산하는데 효과적인 방법으로 여겨진다.KIMOT 등 (101)은 Centella asiatica 털뿌리 배양에 0.1 mmol · L-1 methyl jasmonate (MeJA)를 유도제로 적용한 결과 대조군보다 현저히 높은 함량인 asiaticoside (7.12 mg·mL-1 DW) 가 다량 생성되었다.BAEK S 등 (102)은 Centella asiatica 털뿌리에서 대상 triterpenoids의 생합성을 향상시키기 위해 2.5 mmol ·L-1 squalene과 5 mmol ·L-1 pyruvate 처리를 한 결과, 총 triterpene saponin mass fraction은 각각 57.53, 29.13 mg·mL-1 DW 이었다.게다가, 그 연구 팀의 콘 텐 츠를 다는 것을 발견 triterpene saponins에서 생산 되는 Centella asiatica 털이 많은 루트로 치료 문화 400 μ mol · L-1 MeJA만큼 높은 큽 mg · mL-1 드림웍스다.

체외 배양 외에도 연구자들은 표적 산물을 이질 합성하기 위해 종종 담배와 효모를 섀시 세포로 사용한다 [103].저우징웬 교수 ' s 팀 Jiangnan 대학 으로서 ko로 미세 laboratory-stored GAL80의 변종를 사용 한 섀시 변종, overexpressing 스쿠알렌 영국 측에서 핵심 유전자 경로와 합성 경로를 얻을 수 있 β을 가 진 변종-amyrin 125.8 mg의 생산 · L-1다.그리고 CYP716A12와 ATR1 유전자를 도입하여 CYP716A12:ATR1발현비율과 아세틸 코엔자임 한공급 및 NADPH 재생을 증진시켰다.erucic acid shake flask와 5 L fermenter 에서의 생성 수준은 각각 304.0과 680.8 mg·L-1에 달했다 [104].비슷한 전략을 사용하여, 연구팀은 74.6 mg·L-1 [105]의 수율을 가진 우르솔산 효모 공장을 얻었다.또한, 아시아티코사이드 (asiaticoside)의 생합성 경로를 밝힌 후, 연구팀은 아시아티코사이드 (asiaticoside)를 분해하는 글리코시다제 (glycosidase EGH1)를 제거하고 주요 경로 효소를 도입함으로써 사카로마이세스 세르비지애 (Saccharomyces cerevisiae)를 대사적으로 공학했다.일련의 대사 공학을 수정 한 후, 드 새로 biosynthesis asiaticoside의 5 L fermenter에 달성 된 것,의 수율을 가 진 772.3 μ g · L-1다.이는 아시아티코사이드 (asiaticoside)의 완전한 경로가 미생물에서 밝혀지고 합성된 데 노보 (de novo) 가 밝혀진 최초의 사례이다 [91].

이 춘 교수 ' 칭화 대학의 s 팀은 프로모터로 하여금 속도 제한 단계를 조절하도록 유도하였고, 올레아놀산 합성 경로에서 주요 유전자의 발현을 증진시켰으며, 전구체 풀을 확장하고, 경로를 재구성하였으며, 올레아놀산 생산을 증가시키기 위한 배체를 구성하였다.마지막으로, 100 L 바이오 반응기에서 여러 전략을 조합한 결과 현재까지 보고된 최고 수준인 4.07 g·L-1의 올레아놀산 수율을 얻었다 [106].이 팀과 왕잉' 북경공대의 s 팀은 cytochrome P450과 CPRs를 최적화한 후, cofactor engineering을 통해 acetyl coenzyme A와 NADPH/NADH의 공급을 조절하였다.최종적으로 연구팀은 유전자변형세균 WN85를 이용하여 fed-batch 발효를 하였고, 우르솔산의 생산은 미생물이 합성한 우르솔산 중 가장 높은 수율인 (2 300 ± 180) mg·L-1에 도달하였다 [107].

바 후 G et알다.[93] 설명의 생합성 경로 ursolic 산성 ashwagandha 트리에서 CYP714E107a/CYP714E107b, β-amyrin synthase, CYP716C88, CYP716A233, 그리고 ajmalicine 산 제품 감지 할 수 있다.덴마크 기술대학의 이리나 보로디나 (Irina Borodina) 교수팀은 효모 사카로마이세스 세레비지애 (Saccharomyces cerevisiae)를 발효를 통해 세 가지 가치 있는 식물 트리테르페노이드 (gynosteroic acid, hydroxygynosteroic acid, ajmalicine acid)를 생산하도록 만들었다.그 중 CaCYP714E19p의 n-말단 도메인과 cytochrome P450 효소의 n-말단 도메인을 교환함으로써 [108] 아지말산의 수율을 9.1 mg·mL-1 DCW로 증가시켰다.상기 연구 결과는 asiaticoside 및 기타 유사한 triterpene saponins의 생합성을 위한 전구체를 풍부하게 공급하며, 이후 이들 성분의 무에서 이종 합성을 위한 귀중한 참고 자료를 제공한다.

결론 및 전망 5

센텔라 아시아티카 (Centella asiatica)는 양봉과 (Apiaceae)에 속하는 다년생 생식 식물로, 널리 분포하며 한의학과 인도의 아유르베다 의학에서 중요한 위치를 차지하고 있다.선농벤조징 (선농's Classic of Materia Medica)는 센텔라 아시아티카 (Centella asiatica) 가"심한 열, 악성 창상과 카방클을 치료하고, 붉고 염증이 생긴 피부, 붉은 피부를 가진 열을 치료한다"고 말한다.송나라 수쇼라이 (Su Shou's Book)과 정레이 벤 조 (Zheng Lei's Materia Medica) 에서는"센텔라 아시아티카 (Centella asiatica, 쓰리고 차갑고 독성이 없으며, 발열과 피부병을 치료하는데 적합하다)"라고 기술하고 있는데, 이는 센텔라 아시아티카 (Centella asiatica) 가 옛날부터 피부병 치료에 사용되었음을 의미한다.약리학의 발달로 센텔라아시아티카 (Centella asiatica)는 더 많은 약리학적 활동을 하는 것으로 밝혀졌다.센텔라 아시아티카 (Centella asiatica)에 풍부한 트리테르페노이드 사포닌은 제약 및 화학 산업에서 널리 사용되며, 이들의 독특한 생물학적 활동은 이들 산업에 혁명적인 발전을 가져왔습니다.하지만 이런 물질을 식물에서 직접 추출하는 전통적인 방법은 효률이 낮고 원가가 높은 등 많은 도전에 직면해 있다.한편, 화학 합성은 대안이긴 하지만 종종 가혹한 반응 조건, 운영 복잡성 및 환경 오염과 관련되어 광범위한 적용을 제한합니다.

대조적으로,의 생산에 합성 생물학의 장점Centella asiatica triterpenoids, 환경 친화 성, 광범위한 원료 및 상당한 비용 효율성과 같은, 두드러지고 이러한 화합물을 얻는 새로운 방법으로 만듭니다.합성생물학의 활발한 발전으로이 분야는 식물에서 추출한 천연물의 이형적이고 효율적인 생산에 전례 없는 길을 열어주었다.과학자들은 효모와 담배를"세포공장"으로, 굳은살과 털뿌리를 생물반응기로 삼아 대사경로를 세심하게 설계하고 최적화하여 천연활성성분의 생합성에 큰 잠재력과 전망을 보여주었다.특히, 효모 차대세포에서 asiaticoside를 heterologously 합성하는 합성생물학 전략을 사용하면 원료비가 낮을 뿐만 아니라 전체 발효 준비 공정이 안전하고 제어가 가능하여 대규모 생산을 위한 탄탄한 기반을 마련할 수 있습니다.

최근 센텔라아시아티카 추출물에 대한 관심이 지속적으로 증가하고 있으며, 아시아티코사이드 (asiaticoside)와 같은 성분에 대한 세계적인 수요가 대단히 높다.따라서 연구자들은 트리테르페노이드 함량이 높은 센텔라아시아티카 품종을 연구하고 대사공학 및 유전공학적 방법을 이용하여 목표 활성 성분을 확보하는데 전념하고 있다.Centella asiatica의 트리테르페노이드 구조는 복잡하지만 genomics, transcriptomics, proteomics 등 multi-omics 기술의 통합 및 적용으로 그 생합성 경로가 점차 해명되어 Centella asiatica에서 트리테르페노이드 성분의 생합성을 촉진하고 있다.현재 Saccharomyces cerevisiae를 기반으로 Centella asiatica glycoside를 합성할 수 있지만, 수율이 낮아 현재의 추출 공정을 대체할 산업 생산에 필요한 수준에는 아직 한참 못 미치는 실정이다.

The total synthesis of triterpenoid saponins using Saccharomyces cerevisiae is still a huge challenge. Since it contains a large number of glycoside hydrolases that can seriously interfere with the biosynthesis of triterpenoid saponins, researchers have adopted the method of knocking out the glycoside hydrolases of Saccharomyces cerevisiae to improve the yield, but the effect is still minim알다.In the future, it may be possible to choose yeast, other microbial chassis bacteria for fermentation and synthesis. The continuous advancement of multi-omics technology, molecular breeding, gene editing,metabolic engineering, synthetic biology and other technologies is expected to fully unravel the mystery of the biosynthesis of triterpenoids in Centella asiatica, bringing more green, efficient and sustainable raw material solutions to the pharmaceutical and cosmetics industries.

참조:

[1]  회색 N   E,  무대극 M 한, LAK P, et 알다.  Centella  asiatica-phytochemistry and  메커니즘 of  neuroprotection and   인지 향상 [J.Phytochem Rev, 2018, 17(1):161.

[2]  SUN B, WU L,WU Y 등이 있다.centella asiatica와 triterpenes의 치료적 가능성:고찰.프론트 파솔, 2020, 11:568032.

[3]  제임스 JT,DUBERY I A. Pentacyclic triterpenoids 에서the medicinal herb, Centella  asiatica  (l)도시 [J]이다.2009년 분자, 14 (10):3922호 폐쇄 했다.

[4] 펑취안,시 웬리, 천정이 등.Centella asiatica asperulosid nanoemulsion과 nanoemulsion gel의 경피 특성 및 메커니즘 (Transdermal properties and mechanism of Centella asiatica asperulosid nanoemulsion gel)한의학회지 2018년, 43(9):1857.

[5]  국가약사위원회.약전 (Pharmacopoeia of the People's 중화민국.제1 부 [M.베이징:중국의학과학기술출판사, 2020.

[6]  Lin Chen, Wang Bin, Liu Juzhao 외.Centella asiatica의 화학성분 및 약리학적 효과와 품질표지 예측분석에 대한 연구 진행 [J.한의학정보, 2023, 40(8):70.

[7]  그는L,HONG G,ZHOU L 외.Centella asiatica의 구성성분인 Asiaticoside는 NFATc1과 NF-kappaB 신호경로를 통해 rankkl로 유발된 골세포 생성을 약화시킨다 [J.JCell Physiol, 2019, 234(4):4267.

[8]  THONG-ON W, PATHOMWICHAIWAT T,분좌 S, et 알다. 녹색 extraction  최적화 트리테르페노이드 글리코사이드 농축 Centella asiatica (L.) 추출물반응표면방법론 (RSM)[J]을 이용하여 도시한다.Sci Rep, 2021, 11(1):22026.

[9].  JO S,EL-DEMERDASH 한,OWEN C,외.비눗물 [J]에서 사포닌 생합성을 해제.Nat Chem Biol, 2024,doi:10.1038/s41589-024-01681-7.

[10] 류이, 자오 X,간 F 등.QS-21의 완전 생합성 (Complete biosynthesis of QS-21 in engineered yeast[J])Nature, 2024, 629(8013):937.

[11] 위안 J, 엄마 L, 왕 Y, et 알다. 한 최근에 진화 BAHD acetyltransfer ase, 책임 for  씁쓸 한 soyasaponin  A  생산, 콩 씨앗 발아에 없어서는 안 된다 [J].J Integr 공장 Biol, 2023, 65(11):2490.

[12] 리Y,WANG J,LI L, etal.pentacyclic triterpenoids의 천연 생성물:발견에서 이형 생합성까지 [J].Nat Prod Rep, 2023, 40(8):1303.

[13] 장루, 샤오야오, 류민즈 등.연구논문:ursane-type pentacyclic triterpenes의 생합성에 관한 연구 (J.중국 제약 생명공학, 2024, 19(3):223.

[14] AZERAD R. 화학 structures,  production  and  효소 변환 of  sapogenins and  saponins  에서  Centella  asiatica  (l)도시 [J]이다.피토테라피아, 2016, 114:168.

[15] PUTTARAK P,PANICHAYUPAKARANANT P.에서 pentacyclic triterpenes의 함량에 영향을 미치는 요인 센텔라아시아티카 원료 [J.Pharm Biol, 2012, 50(12):1508-1512.

[16] 정싱팡.Centella asiatica [D]에서 pentacyclic triterpene saponins의 homologue 분리 및 정제 (Separation and purification of pentacyclic triterpene saponins in Centella asiatica [D])항저우:절강대학교, 2011.

[17] 판젠, 카이구이칭, 위안촨쉰 외.madecassic 산의 분리와 결단에 의해 madecassoside β-cyclodextrin 모 바 일 단계 [J] 첨가 방법이다.크로마토그래피, 2007 (3):316.

[18] 우보, 마오렌강, 송춘청 외.HPLC에 의한 asiaticoside의 전환산물 중 asiatic acid B monoglucoside, hydroxyasiatic acid monoglucoside 및 asiatic acid monoglucoside의 결정 [J].Natural Product Research and Development, 2012, 24 (S1):54.

[19] 양루몽, 티안 준, 이윤청.Centella asiatica의 주요 triterpenoids 측정방법의 최적화.Northwest Botanical College 저널, 2024, 44 (10):1639.

[20] 웽 X X, 샤오이, 첸이 등.센텔라 아시아티카 (Centella asiatica) [J]의 새로운 담마라네 모노데스모사이드 2 종.J 아시아Nat Prod Res, 2011, 13(8):749.

[21] WENG X X, 황W W, KONG D Y. Centella asiatica (J)의 triterpenoid 성분 및 약리학적 활동에 대한 연구 진행.중국제약산업학회지 2011, 42 (9):709.

[22] 주준이, 천윈타오, 니유통 외.Centella asiatica 추출물의 피부에 대한 약리학적 효과 및 기전에 대한 연구 진행 [J.산동의학, 2023, 63 (20):99.

[23] YAO CH,YEH J Y,첸Y S 등.포함하는 전기방사 젤라틴 나노섬유의 부유효과 (Wound-치유effect of electrospun gelatin nanofibres 센텔라 아시아티카 추출물 (Centella asiatica extract in rat model[J.J Tissue Eng Regen Med, 2017, 11(3):905.

[24] SH 한, TAHER M, MANDAL U K, et 알다. 약리 학적 속성 of  Centella  asiatica  습니까 in  가속 상처 healing  토끼 [J.BMC Complement Altern Med, 2019, 19(1):213.

[25]. 호 P,  일 오후 성 J, 기성 천 K, et 알다. 항 염증 effect  of  Centella  asiatica  phytosome in  a  마우스 모델 phthalic anhydride-induced 아토피 피부염 [J.Phytomedicine, 2018, 43:110.

[26] 셴 X,  궈 M, 유 H,  et 알다. Propionibacterium 여드름 관련 anti-inflammation and  skin  수화 활동 of  madecassoside, Centella asiatica[J]의 pentacyclic triterpene saponin.Biosci Biotechnol Biochem, 2019, 83(3):561.

[27] Nie 연풍.센텔라아시아티카 추출물의 제조 및 화장품에의 응용 [D].광저우:지난 대학, 2017.

[28]지 앙 H, 조우 X, CHEN  l. Asiaticoside 지연 오래되 었 and  약화 세대 의 ROS 자외선에 노출 ‑ through cell은 TGF‑beta1/Smad 경로 [J]를 조절합니다.Exp Ther Med, 2022, 24(5):6 67.

[29] QUILES J, 카브 레라 M,  존스 J, et 알다. In  체외 결단력 of  the  skin  anti-aging  potential   of  0 식물성 성분 [J.분자, 2022, 27(22):8101.

[30] 싱 B, 라스토기 R P. A reinvestigation of the triterpenes of Centella asiatica[J].Phytochemistry, 1969, 8(5):917.

[31] 조 S Y, 왕 W, 난 F F 등.아시아산은 자궁내막 상피세포에서 LPS로 인한 염증반응을 억제한다 [J].Microb Pathog, 2018, 116:195.

[32] WU T, GENG J, GUO W 등.아시아산은 미토콘드리아를 파괴함으로써 체외 및 체내에서 폐암세포 성장을 억제한다 [J].Acta Pharm Sin B, 2017, 7(1):65.

[33] 류 Y, 장 D,등 J 등.Centella asiatica total glycosides nitric oxide gel의 제조 및 안전성 평가 및 당뇨병성 피부궤양에 대한 치료효과 (J.Evid-Based Compl Alt:eCAM, 2022, 2022:1419146.

[34] Xu H, He C, Luo S 외.센텔라 아시아티카 (Centella asiatica)의 5가지 트리테르페노이드 성분 측정을 위해 1 측정-다중 평가 방법을 병행한 지문지도 작성.Chinese Journal of Pharmaceutical Sciences, 2021, 56(3):181.

[35] 마츠다 H, MORIKAWA T,  UEDA H, et 알다. 약효 가 있는 식품이다. XXVII다. 사포 닌 유권자들 of  gotu kola (2): 구조 스리랑카에서 재배된 센텔라 아시아티카 (Centella asiatica)의 새로운 ursane과 oleanane-type triterpene oligoglycosides, centellasaponins B, C, D.Chem Pharm Bull (도쿄), 2001, 49(10):1368.

[36] 푸타락 P, 딜로크손사쿨 P, 사오카에우 S 등.통나무 (Centella asiatica, L.)의 영향Urb다.인지기능과 기분관련 결과에 관한 체계적 고찰 및 메타분석.Sci Rep, 2017, 7(1):10646.

[37] 아지스 H A, 타헤르 M, 아흐메드 A S 외.Centella asiatica 추출물의 methanolic fraction의 In 체외및 In vivo 상처 치유 연구 (J.S Afri J 봇, 2017, 108:163.

[38] 우양산단, 누춘양.화상 상처 치유 및 내피세포 손상에 대한 마데카소사이드의 보호 효과 [J.중국materia, 2014, 37(4):645.

[39] 송 D, 장 X, 류 Y 등.Asiaticoside는 세포 성장 억제를 약화시킵니다 and  인간의 뇌 미세혈관 내피세포에서 tlr4/nf-kappab 신호전달 경로를 억제하는 것을 통해 abeta(1-42)에 의해 apoptosis 가 유도되었다 [J].프론트 파솔, 2018, 9:28.

[40] MOQBEL S, HE  Y, XU L, et 알다. 쥐 chondrocyte 염증 and  골관절 염 are  마데카소사이드 [J]에 의해 개선되었다. Oxid 의대 Cell Longev, 2020, 2020:7540197.

[41] 왕 W, 우 L,리 Q 등.Madecassoside는 p38/NF-kappaB를 억제하고 Nrf2/HO-1 신호전달을 활성화시킴으로써 LPS/d-galn 유도 생쥐에서 급성 간부전을 예방한다 [J].Biomed Pharmacother, 2018, 103:1137.

[42] NHIEM N X, TAI B H, QUANG T H 등.Centella asiatica 잎의 새로운 ursane-type triterpenoid glycoside는 활성화된 RAW 264.7세포에서 nitric oxide의 생성과 tnf-α의 분비를 조절한다 [J].Bioorg Med Chem Lett, 2011, 21(6):1777.

[43] 양 L, 장 L, 두 J 외.Elsholtzia bodinieri[J]의 새로운 oleanane triterpenoid 사포닌 2 종.Nat Prod Res, 2021, 35(21):3658.

[44] 웽 X 장 J, 가오 W 등.의 새로운 펜타시클릭 트리테르페노이드 2개 센텔라 아시아티카 (Centella asiatica, J.2012년 9월 25일에 확인함. Helvetica Chimica Acta, 2012, 95:255.

[45] 장즈, 장 X 엠, 저우제이 등.의 새로운 트리테르페노이드 글리코사이드 센텔라 아시아티카 (Centella asiatica, J.2005, 88:297 쪽.

[46] YY D, T L, YD L 등.Centella asiatica에서 분리한 triterpenoids의 광노화 방지 활성 (J.Phytochemistry (식물화학), 2024, 228:114246.

[47] WU C, DUAN Y H, LI M M 등.Schefflera heptaphylla[J]의 줄기에서 나온 Triterpenoid 사포닌.Planta Med, 2013, 79(14): 1348.

[48] 루말라 C S, 알리 Z, 위라 소리야 A D 외.에서 2개의 새로운 트리터펜 글리코 사이드 센텔라 아시아티카 (Centella asiatica, J.Planta Med, 2010, 76(10):1018.

[49] SHAO Y Q,OUYANG D, GAO W 등.의 3가지 새로운 펜타시클릭 트리테르페노이드 센텔라 아시아티카 (Centella asiatica, J.chemnotify, 2014, 97(7):992.

[50] Weng Xiaoxiang, Chen Yunyun, Shao Yan 외.Centella asiatica의 새로운 ursane-type triterpene glycoside.중국제약산업학회지 2011, 42 (3):187

[51] SHAO Y Q, OUYANG D, CHENG L 등.의 새로운 pentacyclic triterpenoids입니다 센텔라 아시아티카 (Centella asiatica, J.2015년 9월 6일에 확인함. Helvetica Chimica Acta, 98:683.

[52] 펑 X, 루 Y H, 류 Z 등.Cunninghamella echinulata에 의한 항당뇨병제 corosolic acid의 미생물 형질전환 (J.J Asian Nat Prod Res, 2017, 19(7):645.

[53] 촌서트 P, ROMYASAMIT C, KONYANEE A, 외.센텔라 아시아티카 (Centella asiatica)의 잠재적 활동 병원성 세균에 대한 잎 추출물-관련 생균과 항염증 효과 [J.Adv Pharmacol Pharm Sci, 2024, 2024:5 959077.

[54] 가야트리 K,아비난드 P A, 가야트리 V 외.에 대한 phytocompound의 전산분석 Centella  asiatica  그것의 항 섬유성 및 약물 유사성 특성 때문에-약물 연구에 허브 [J].Heliyon, 2024, 10(13):e33762.

[55] SOLET J M, SIMON-RAMIASA A,COSSON L, 그 외.학명:Centella asiatica (L.)Urban, (Pennywort):세포배양, 테르페노이드의 생산, 그리고 생물변환능력 [M]//Bajaj Y P S. 약용 및 방향성 식물 X. Berlin, idelberg:Springer,1998:81.

[56] 구로다 M, 미마키 Y, 하라다 H 외.센텔라 아시아티카 (Centella asiatica) [J]의 새로운 트리테르펜 글리코사이드 5 종.J Nat Med, 2001, 55(3):134.

[57] 슈클라이 엔, 바 R,  TRIPATHI A  K, et 알다. 성격 묘사 of  an  ursane  triterpenoid  에서 Centella  asiatica  with  spilarctia obliqua[J]에 대한 성장 저해 활성.Pharm Biol, 2000, 38(4):262.

[58] QL Y, HQ D, Y T, 외.센텔라 아시아티카 [J]의 소설 트리테르펜.2006, 스위스 바젤 (Basel, Switzerland), 분자 (molecule), 11 (9):661.

[59] 마에다 C, 오타니 K, 카사이 R 외.Oleanane과 ursane glycosides 에서Schefflera octophylla[J].Phytochemistry, 1994, 37(4):1131.

[60] YANG H M, YIN Z Q, ZHAO M G 외.Cyclocarya paliurus 로부터 Pentacyclic triterpenoids와 ffa로 유도된 HepG2 steatosis 세포에서의 항산화 활성 [J.Phytochemistry, 2018, 151:119 쪽.

[61] 유 Q, 두안 H Q, 가오 W Y 등.새로운 triterpene와 Centella asiatica[J]의 saponin.중국화학편지, 2007, 18:62.

[62] 우 Z W,리 W B, 저우 J 외.Centella asiatica의 Oleanane과 ursane-type triterpene saponins은 신경보호 효과를 나타낸다 [J].J Agric Food Chem, 2020, 68(26):6977.

[63] 사후 N P, 로이 S K, 마하토 S B다. 로부터 triterpenoid trisaccharides의 구조를 분광학적으로 결정 Centella  asiatica다 [J다]Phytochemistry, 1989, 28:2852 쪽.

[64] 양 G X, 장 R Z, 루 B 외.Melastoma dodecandrum의 화학성분과 HT-29세포에서 interleukin-8 생성에 대한 저해 활성 [J.Nat Prod Res, 2014, 28(17):1383.

다운 [65] A,  TALOM B,  KAPCHE G,  et 알다. Termiglaucescin, a  새로 운 polyhydroxy triterpene  glucoside  from   Terminalia glaucescens 항산화 및 항 염증 가능성이 있는 [J].Z Naturforsch C J Biosci, 2017, 72(5/6):203.

[66] 가오 J, 황 F, 장 J 외.Actaea asiatica[J]의 세포독성 cycloartane triterpene 사포닌.J Nat Prod, 2006, 69(10): 1500.

[67] 마나 P, 실 P C. 아르주놀산:타입에 이로운 역할 1 당뇨병 및 그와 관련된 장기 병태생리 [J.Free Radic Res, 2012, 46(7):815.

[68] GHOSH J, SIL P C. Arjunolic acid:a new multifunctional therapeutic promise of alternative medicine[J]의 약자.바이오치미, 2013, 95(6): 1098.

[69] 유콴린, 가오원위안, 장옌원 외.Centella asiatica의 화학적 조성에 관한 연구.대한한의학회지 2007, 32(12):1182.

[70] 요시카와 M, 마츠다 H, 모리카와 T 등.약용 식품이다.XXVI다.aldose reductase의 억제제와 새로운 triterpene 및 그 oligoglycoside인 centellasapogenol A와 centellasaponin A는 Centella asiatica (Gotu Kola)[J.이성환, 2001, 55:1499.

[71] 쿠 Y,  류 H Y, 구 X X, et 알다. 변환하는 중 ginsenosides from  줄기 and  잎 전자 레인지 가공을 통한 Panax noto인삼의 그리고 그들의 항응고제 및 항암 활동을 개선 [J].RSC Adv, 2018, 8(70):4 0471.

[72] 류소기, 류샤, 류푸성 등.종합품질평가에 기초한 Centella asiatica의 최적 수확시기에 관한 연구 (J.대한한의학회지 2023, 41(12):73.

[73] WAN L,  HUANG  Q,  LI  C,  et 알다. 통합 metabolome and  transcriptome 분석 식별 후보 유전자 관련 된 in  Centella asiatica (L.) 잎의 triterpenoid saponin 생합성도시 [J]이다.전선공장 Sci, 2023, 14: 1295186.

[74] 한 X, 자오제이 (ZHAO J), 조우환 (ZHOU H), et 알다. 그 biosynthesis asiaticoside의 그리고 madecassoside는 tandem을 밝힌다 중복-directed 진화 아피목 (Apiales)의 glycoside glycosyltransferases [J.Plant Commun, 2024,5(10):101005.

[75] 리자오 전, 손정해, 채치항 외.LC-MS를 이용한 Centella asiatica의 부위별 화학성분 분석 [J.서부산림과학, 2022, 51(4):75.

[76] 아지즈 Z A, 데이비 M R, 파워 J B, et 생산을 알다. asiaticoside의 그리고 마데카소사이드 Centella  asiatica  in  vitro  and  in  생체 실험다 [J다]Biologia Plantarum, 2007, 51(1):34.

[77] GUNTHER B, WAGNER H. 트리테르펜스의 정량 결정 부제:in extracts and phytophrases of Centella asiatica (L.) urban[J].Phytomedicine, 1996, 3(1):59.

[78] 황옌펜, 린쉬안링, 완링윤 외.LED 광질이 Centella asiatica (J)의 생장과 총 saponin 함량에 미치는 영향.조명공학회지 2023, 34(5):19.

[79] WON J H, SHIN J S, PARK H J, 외.LPS로 유도된 RAW 264.7대식세포에서 nf-kappab 경로의 억제를 통한 madecassic acid의 항염증 효과 (J.Planta Med, 2010, 76(3):251.

[80] 빌카 W, 즈나즈데크-아와이젠 P, 스터진스카-스로카 E 등.(영어) Centella asiatica in dermatology:an overview[J].Phytother Res, 2014, 28(8):1117.

[81] THIMMAPPA R, GEISLER K, LOUVEAU T 등.식물에서의 Triterpene 생합성 [J.Annu Rev Plant Biol, 2014, 65:225.

[82] Wei YD, Xiong C, Zhang TY 외.transcriptome 자료를 이용한 마름 내 triterpenoid saponins의 합성 경로 연구.대한한의학회지 2019년, 44(6):1135.

[83] KIM O T, AHN J C, HWANG S J, 외.연구논문:farnesyl diphosphate synthase의 Cloning과 발현 (expression of a farnesyl diphosphate synthase in 학명:Centella asiatica (L.)도시 [J]이다.Mol Cells, 2005, 19(2):294.

[84] KIM O T, SEONG N S, KIM M Y, 외.squalene synthase cDNA Fromcentella asiatica (L.)의 분리 및 특성도시 [J]이다.J Plant Biol, 2005, 48(3):263.

[85] KIM O T, KIM M Y, HUH S M 외.Centella asiatica (L.)의 asiaticoside 생합성과 연관된 oxidosqualene cyclase를 아마도 암호화하는 cDNA Cloning도시 [J]이다.Plant Cell Rep, 2005, 24(5):304.

[86] 티 넨 K,  POLLIER J,  BUYST D,  et  알다. The  고대 CYP716 family  is  a  주요 기여 자 to  the  다양화 of  eudicot triterpenoid 생합성 [J].Nat Commun, 2017, 8:14153.

[87] KIM O T, UM Y, 진M L, 외.새로운 다기능성 C-23 산화효소인 CYP714E19는 아시아티코사이드 생합성에 관여한다 [J.식물세포생리학, 2018, 59(6):1200.

[88] 드 이발사 코스타 F C, 김 Y B, et  알다. 분자 an의 복제 ester-forming triterpenoid:udp-포도당   약용식물로부터 사포닌 생합성에 관여하는 28-O-glucosyltransferase 센텔라 아시아티카 (Centella asiatica, J.Plant Sci, 2017, 262:9.

[89] 한 X, 자오 J, 창 X 등이 있다.Centella asiatica의 전사체 자료를 재방문한 결과 ester-forming triterpenoid:udp-포도당 28-O-glucosyltransferase[J] 가 확인되었다.팔면체, 2022, 129:133136.

[90] 김 O  T,  JIN  M  L,  리 D  Y,  et  al.  성격 묘사 of  the  asiatic  acid  glucosyltransferase, UGT73AH1, 관련 된 in  부제:asiaticoside biosynthesis in Centella asiatica (L.)도시 [J]이다.Int J Mol Sci, 2017, 18(12).

[91] 자오 X, 웨이 W,리 S 등.부제:Elucidation of the biosynthesis asiaticoside의and its reconstitution in yeast[J.ACS 지속 가능한 화학 &공학, 2024, 12(10):4028.

[92] 스리바스타바 G, 뱌스 P, 쿠마 A, et  알. 역할 풀기 시토크롬 P450의 효소 in  oleanane triterpenoid 생합성 아르주나 나무 [J.2024년 플랜트 J.

[93] ONG G H, WONG L S, TAN A L 등.금속오염토양이 고투콜레라 (Centella asiatica)의 중금속 축적에 미치는 영향과 잠재적 건강위험:반도지역 말레이시아의 연구.Environ Monit assessment, 2016, 188(1):40.

[94] 우 T, 커블러 S M, 퍼니 A R 외.2차 대사산물 생산을 위한 heterologous bio-factory 로서 식물세포배양 [J.Plant Commun, 2021, 2(5):100235.

[95] 왕후안, 리진신, 리잔리 등.식물조직배양기술의 한약자원 (韓藥資源) 응용대한한의학회지 2017년, 42(12):2236.

[96] 장 C, 왕 S, 왕 Y 등.한약자원의 지속가능한 개발을 위한 약용식물의 조직배양기술 응용 연구.대한한의학회지 2023, 48(5):1186.

[97] 프라사드 A, 매서 A, SINGH M, 외.성장 그리고 약초의 여러 촬영 배양에서 asiaticoside 생산, 학명:Centella asiatica (L.)영양소 조작 [J]의 영향으로 도시.J Nat Med, 2012, 66(2):383.

[98] GANDI S, GIRI A. 로부터 아시아산의 생산 및 정량 시험관 (in vitro raised) Centella asiatica의 새싹과 굳은살 배양 (l)도시 [Z]이다.2013.

[99] JAMES J T, MEYER R, DUBERY I A. 굳은살, 세포정지, 잎의 4가지 트리테르페노이드 조성을 통한 남부 아프리카 Centella asiatica의 2가지 표현형 특성.Plant Cell Tiss Organ Cul, 2008, 94(1):91.

[100] LOC N H, 나햇엔 T. 생산 of asiaticoside  from  centella  (Centella asiatica  L. 도시) 세포 바이오시밀러 [J]에서. Asian  Pac J  Trop Biomed, 2013, 3(10):806.

[101] 김 O T, 방 K H, 신이영 (SHIN Y S), et al.의 털이 많은 뿌리 문화로부터 아시아 티코사이드의 생산을 향상시켰습니다 Centella asiatica  (l)methyl jasmonate[J]에 의해 이끌어낸 도시한다.Plant Cell Rep, 2007, 26(11):1941.

[102] 백 S,'T, LEE H, et al.in의 triterpenoids의 생합성 강화 Centella  전구체 먹이에 의한 asiatica 털뿌리 배양 그리고 이끌어내는 [J.Plant Biotechnol Rep, 2020, 14(1):45.

[103] 쉬웬롱, 왕젠, 마잉 외.한약에서 활성성분의 생합성 경로 분석에 관한 연구 진행.대한한의학회지 2023, 48(9):2273.

[104] 두안 리나, 장웨이주, 손양 외.oleanolic acid의 효율적인 합성을 위한 Saccharomyces cerevisiae의 대사공학.식품 및 발효산업, 2024, 50 (18):67.

[105] 자오 싱잉, 장웨이주, 저우징원.우르솔산의 효율적인 합성을 위한 Saccharomyces cerevisiae의 대사공학 (J.식품 및 발효산업 2024, 50 (20):9.

[106] 청 X, 팡 Y, 반 Y, 외.공학적으로 제조된 Saccharomyces cerevisiae에 의한 oleanolic acid 생합성 향상을 위한 여러 가지 전략 (Application of multiple strategies to enhance oleanolic acid biosynthesis by engineered Saccharomyces cerevisiae[J.바이오사우어 테크놀, 2024, 401:130716.

[107] 지아 엔,리 제이, 짱지 외.cofactor Engineering과 acetyl-CoA 최적화를 통한 ursolic acid의 고효율적인 생산을 위한 Saccharomyces cerevisiae 공학 [J.Biochem Eng J, 2024, 203:109189.

[108] ARNESEN J  A,  벨 몬 D  A  A,  JAYACHANDRAN  S,  et  al.  공학 of  Yarrowia lipolytica for  the  production  of  식물 트리테르페노이드:아시아산, 마데아스기, 아르주놀산 [J.Metab Eng Commun, 2022, 14:e197 (영어).