흑미 추출물 시아니딘 3 글루코사이드의 놀라운 이점

Cyanidin-3-Glucoside은 무엇 입니까?

Cyanidin-3-glucoside (Cy-3-glc, C3G) 은 가장 흔 한, 광범 위하게 분산 되고 풍부 한 anthocyanoside anthocyanidin 화합물 중에서 [1] [2].콘플라워-3-글루코사이드 (Cornflower-3-glucoside)는 주황색, 적색, 보라색 식물 등 어두운 색의 식물의 잎, 열매, 뿌리에서 흔히 발견되며, 특히 흑미 [3]에서 많이 발견된다.Cornflower-3-glucoside는 anthocyanoside 군에 포함된 안토시아닌 중 하나로, 국내외에서 많은 연구 결과 Cornflower-3-glucoside는 심혈관 질환 예방, 시각적 피로 개선, 당뇨병 환자 감소 &와 같은 다양한 생물학적 활성을 가지고 있다#39;염증, 등등.

Cyanidin-3-Glucoside의 구축은 무엇인가?

안토시아노사이드는 플라보노이드에 속하므로 플라보노이드의 전형적인 구조, 즉 C3-C6-C3를 기본 골격으로 하며, 2-페닐크로멘 [4]의 유도체이다.안토시아닌의 모체는 안토시아닌인데, 안토시아닌은 불안정하기 때문에 자연에서는 주로 안토시아닌이 리간드로서 다른 당과 결합하여 다른 당질, 즉 안토시노사이드를 형성한다.대부분의 안토시아닌은 3,5,7 탄소 부위에 히드록시기가 치환된다.b-고리의 치환기의 차이로 인해 서로 다른 안토시야노사이드가 형성된다.현재, 6 자연에서 가장 흔한 안토시노사이드는:시아닌딘, 펠라르고니딘, 델피니딘, 페오니딘, 페우니딘 그리고 말비딘이다.안토시노사이드에서 결합하는 당의 종류, 위치, 양이 다르기 때문에 안토시노사이드도 다르다.주로 결합하는 당은 포도당, 람코, 갈락토스, 자일로스 등의 단당류와 람노포도당, 아카시아이당류 [5]등의 이당류이다.콘플라워와 포도당이 결합하여 형성된 3-글루코사이드의 구조를도 1-1에 나타내었다.

Fig.1-1    Cyanidin-3-glucoside의 구조

콘 텐 츠의 Cyanin-3-Glucoside에 검은 쌀 추출

문헌에 따르면,의 내용Cyanidin-3-Glucoside흑미에서는 굉장히 풍부한데 [6], 징왕 등 [7]은 실험적으로 흑미의 Cyanidin-3-glucoside 함량이 최대 (1.017 ± 0.028) mg/g 이라는 결론을 내렸다.

본 실험에서는 흑미 추출물을 실험재료로 사용하였고, 그 Cyanidin-3-glucoside를 AB-8대성 수지, 폴리아미드, 덱스트란겔 등 3 종류의 충전제를 차례로 크로마토그래피 컬럼에 의해 정제하여 Cyanidin-3-glucoside를 얻었으며, 순도는 계산 후 95%에 도달할 수 있었다.

1 실험 방법

1. 1 기술적인 방법

흑미 추출물로부터 Cyanidin-3-Glucoside 제조

Fig 2대 1로 Cyanidin-3-Glucoside의 제품 검출조건

흑미 추출물의 Cyanidin-3-Glucoside 정성 및 정량 분석 1.2

1.2.1시료 준비

검은 쌀 안 토시아 닌 테스트 솔루션, 냉동 건조 후 동결 건조 무게 가 10 mg 파우더, 그것은 6% 포름 산,에 녹이고 지속적인 볼륨에 10 mL, 그런 다음의 바늘 필터를 0. 2 μ m 사용 하여 사용 되었을 여과와 초고를 사용 하여 수행 되었결정 성능 액체 크로마토그래피 트리 플 4 단계 로드 발 맞 춰 질량 분석 계다.

Table2-1 Gradient Elution 절차 대한 UPLC

정성 및 정량 방법 1.2.2

질적방법 (1)

의 질적 분석에 의해 수행 되었샘플을 구분하고 정화 되 한 초고 성능 액체 크로마토그래피의 검색 아래 (UPLC) 열 다중 반응 모니터링 (MRM) 모드, 자외선 (자외선)와 질량 분석와 결합 (MS) 분석의 보존 시간을 확인 하여 Cyanidin-3-glucoside Cyanidin-3-glucoside 제어 및에서 고립 되고 정화 된 검은 쌀 추출 물이다.

(2) 양적 방법

10 mg의 흑인 쌀 추출, A1, A2, A3, A4, B1, B2, B3, B4, B5, 그리고 C1은 정확하게 무게는 6%와 100 ml 체적 플라스크에 축약 된 포름 산, 아래의 Cyanidin-3-glucoside 제어와 측정 동일 한 chromatographic 조건, 그리고 준비 된 솔루션의 농도에서 얻었표준 곡선 방정식, 그리고 각 표본의 순수 테스트 할 (2의 계산에서 입수 되었방정 식이다.1)다.

1. 3 흑미 추출물로부터 Cyanidin-3-Glucoside의 분리 및 정제

1.3.1Degreasing의 흑인 쌀 추출 물

1.3.2 준비의 안 토시아 닌 검은 쌀 추출 물에서 추출

1.3.3 흑미 추출물로부터 Cyanidin-3-Glucoside 분리 및 정제

(1) 별거와 흡착에 의해 정화 AB-8 Macroporous 수지

(2) 폴리 아미 드 열 크로마토그래피

(3) 겔 컬럼 크로마토그래피에 의한 분리 및 정제

2. 결과 및 토론

2.1Qualitative Cyanidin-3-Glucoside인 블랙 쌀의 정량적 분석 추출 물을

2. 2 최적화 질량 분석의 기준의 본질에 대한 매개 변수 Cyanidin-3-Glucoside

그림 2-2와 같이.

흑미 추출물의 Cyanidin-3-Glucoside 정성분석 2.3

확립된 질량분석기 변수를 바탕으로 초고성능 액체크로마토그래피를 통해 흑미 추출물의 cyanidin-3-glucoside의 유지시간을 확인하였다.그림 2-3 (A)에 나타낸 바와 같이 시아니딘 3-glucoside 표준용액의 유지시간은 3.46분이다.그림 2-3 (B)에 나타낸 바와 같이 흑미 안토시아닌 추출액에서의 주크로마토그래피 피크의 유지시간은 3.46분이므로 흑미 내 주크로마토아닌은 cyanidin-3-glucoside이다.

흑미 추출물의 Cyanidin-3-Glucoside 정량 측정 2.4

그림 2-4와 같이 농도를 수평축으로하고 최고면적을 수직축으로 하는 표준곡선을 그린다.회귀 방정식에 Y = 79.027X + 85.746 (Y는 피크 지역, X는) 농도, 상관 계수 R2 = 0.9991, 그리고 cyanidin-3-glucoside의 선형 관계의 범위 안에 있는 것은 좋은 19. 2 134.40 ng/ml.

Fig.2-3   흑미의 크로마토그램 및 Cyanidin-3-Glucoside ( C3G) 표준

Table2-2   Cy-3-glc의 피크 면적 표준 솔루션

Fig.2-4   그 표준 곡선 C3G의

2. 5의 고립과 정화의 Cyanidin-3-Glucoside 검정색에서 쌀 추출

2.5.1 AB-8대 다공성 수지 흡착법

Fig.2-5  흑미 추출물의 안토시아닌의 크로마토그램

Fig.2-6   흑미로부터 분리한 C3G의 크로마토그램은 AB-8대성 수지 흡착으로 하였다

주:그림 A:A1의 크로마토그램;그림 B:A2의 크로마토그램;A3의 피겨 C:크 로마 토 그램이다;그림 D:A4의 크로마토그램

2. 폴리 아미 드 열 크로마토그래피

80% 무수 에탄올을 사용하고 앞으로 그라 데이션을 수행 할 수 있는 에탄올 용출 폴리 아미 드 크로마토그래피에들어 있는 열 액 A1과 순서 대로 A4,로 그림 2-7에 나와 있습니다.UPLC-MS/MS 검출결과의 크로마토그램에 따라 흑미 중 Cy-3-g1c를 분리,이 방법을 이용하여 정제하였으며, 피크타임은 AB-8 결과와 일치하였다.계산 한 후,의 순수 B1, B2, B3, 그리고 B4 91.6%었고, 각각 92.3%, 93%, 그리고 92%, 입니다.A1과 A4과 비교 해 볼 때,의 순도 cyanidin-3-glucoside 정화와 폴리 아미 드, 후 크게 개선 되었음을 나타내 폴리 아미 드 정화에서 중요 한 역할을 했하는 방법이 cyanidin-3-glucoside의 분리와 정화에 검은 쌀 추출 물이다.

참고:A:B1 크 로마 토 그램;B:B2 크로마토그램;C:B3 크로마토그램;D:B4 크로마토그램;E:B5 크 로마 토 그램

2.5.3 겔 컬럼 크로마토그래피

그림 2-8과 같이 폴리아미드 정제 방법을 통해 고순도의 cyanidin-3-glucoside를 얻었다.검출결과를 C1 크로마토그램과 B5 크로마토그램과 비교한 결과,이 방법을 이용하여 흑미 추출물에서 cyanidin-3-glucoside를 분리 및 정정한 후 불순물 피크는 발견되지 않았음을 알 수 있다.탐지 후,의 순수 C1 95%로 계산 되었, 약간 순도의 개선, 볼 수 있는 그 젤 열 크로마토그래피 cyanidin-3-glucoside의 분리와 정화 촉진시 킬 수 있다.

계산 결과 순도 95%인 cyanidin-3-glucoside의 제조율은 0.098%로 실험실&에 근접하였다#39;s 이전 흑미에서 cyanidin-3-glucoside 함량 0.1% 검출.동시에 cyanidin-3-glucoside 함량이 (1.017 ± 0.028) mg/g으로 Wang Jing 등 [8]이 얻은 자료에 비해 작은 차이가 있어 본 실험에서 사용한 방법이 얻은 화합물의 제조율이 높고 순도가 높아 널리 홍보할 가치가 있음을 알 수 있다.

Fig.2-8의 chromatograms C3G 포도당에 쌀 흑인 젤 열에서 분리 색 층 분석법

3. 요약

본 연구는 흑미 추출물의 cyanidin-3-glucoside의 정성 및 정량분석을 위해 UPLC-MS/MS를 사용하였다.의 기준 물질을 비교 함 으로써 보존과 시간 cyanidin-3-glucoside 같은 질량 분석 아래, 액체 단계, 그리고 자외선 조건, 그것은 될 수 있 다는 결론을 안 토시아 닌 검은 쌀 추출 정화 고립 되고 량은 cyanidin-3-glucoside이다.그 결과는 문헌에 보고된 결과와 일치하였다.

흑미 추출물 시아니딘 3 글루코사이드의 놀라운 이점

흑미 추출물 cyanidin-3-glucoside는 활성산소 제거 [9], 산화 방지 [10], 항염증, 항종양 [8], 당뇨병 예방 및 신기능 개선 [11][12][13], 간 보호, 시력 보호, 허혈성 뇌졸중 [14][15][16] 으로부터 뇌를 보호하는 등 많은 생리 활성 [10-13]이 있다고 보고되고 있다.연구 결과 보고된 바와 같이, cyanidin-3-glucoside는 항산화 스트레스를 통해 허혈성 뇌 손상 후 보호 효과를 가지며, 내피 산화 질소 합성 촉진, 항염증, 신경세포 사멸 억제, 혈장 케모카인 발현을 촉진합니다.

Hao et al. [6]에 따르면 cyanidin-3-glucoside를 크게 줄 일 수 있는 높은 수준의 혈청 creatinine과 요소 질소,의 수준을 뿐만 아니라 xanthine oxidase, 질소 산화물에 malondialdehyde, 그리고 신장 KBrO3 심각 한 신장에서 부상 유도 쥐에 의해 발생 한다.신장에 대한 그것의 보호 효과는 안토시아닌의 자유 라디칼 청소 능력입니다.장추양 등 (17)은 세포 내 산화적 스트레스에 유발된 H2O2에 대한 cyanidin-3-O-glucoside (C3G)의 보호 효과를 연구하기 위해 인간 간암 세포주 HepG-2를 모델로 사용하였다.그 결과 cyanidin-3-glucoside는 0-0.5 mmol/L의 범위에서 HepG-2세포에 유의한 독성이 없었다;높은 (400 μ Mol/L),에서 중간 (200 μ Mol/L), 낮은 (50 μ cyanidin-3-glucoside 치료의 3 농도에서 상당히 증가 Mol/L)을 총 용량, 항 산화 superoxide dismutase 활동, 세포의 및 글 루타 티 온 감소 콘 텐 츠, 줄이면서 세포 내 malondialdehyde 콘 텐 츠 가 있습니다.송난 등 (18)은 cyanidin-3-glucoside 가 Alzheimer&의 포도당과 지질대사에 미치는 영향을 조사하였다#39;s 병 (AD) 모델 생쥐.이 결과는 cyanidin-3-glucoside 가 JNK/AKT 경로를 통해 인슐린 저항성과 염증 반응을 조절하여 AD 모델 생쥐에서 뇌 포도당 대사 장애를 효과적으로 개선시키지만 지질 대사를 크게 조절하지는 않으며, 뇌의 해마에서 연령 관련 플라크의 침착을 억제할 수 있음을 보여준다.

Yu Renqiang 등 19)이 비만쥐에서 cyanidin-3-glucoside 가 체중, 혈중지질 및 인슐린 저항성에 미치는 영향을 조사하고자 하였다.비만쥐를 고지방 식이로 유도하여 무작위로 대조군과 실험군으로 나누었다.실험군은 cyanidin-3-glucoside 100 mg/(kg · d)를 투여하였고, 대조군은 동일한 양의 생리식염수를 투여하였다.5주간 지속적으로 가식후 실험군의 체중, 내장지방량, 평균식품에너지이용률, 총콜레스테롤, 중성지방, 저밀도지단백 콜레스테롤, 동맥경화지수, 공복혈당, 혈청인슐린, 인슐린저항성지수가 대조군에 비해 유의적으로 낮게 나타났다 (r<0.05),고밀도 지단백 콜레스테롤과 혈청 아디포넥틴이 대조군에 비해 유의적으로 높기는 하였으나 (r<0.05), 따라서 cyanidin-3-glucoside 가 체중을 늦추고, 내장지방량을 증가시키며, 비만쥐에서 비만관련 포도당 및 지질대사 장애 및 인슐린 저항성을 개선할 수 있다는 결론을 내릴 수 있으며, 그 기전이 혈청 아디포넥틴 분비 증가와 관련이 있을 것으로 추측할 수 있다.린후이 등 18명은 쥐 실험을 통해 콘플라워 3-glucoside 가 납으로 유발된 간 및 신장 손상에 미치는 영향을 탐색했다.그 결과 콘플라워 3-glucoside는 납으로 유발된 간 및 신장 손상에 상당한 보호 효과를 보였으나 작용 기전은 아직 더 많은 연구가 필요한 것으로 나타났다.

검은 쌀 추출 Cyanidin-3-Glucoside 실험:

국내외에서 cyanidin-3-glucoside에 대한 연구 결과, 심혈관 질환 예방, 당뇨병 환자의 시각적 피로 개선 및 염증 감소 등의 다양한 생물학적 활성을 가지고 있으나, 혈액 및 관련 조직에서 검출된 cyanidin-3-glucoside의 함량은 극히 낮은 것으로 나타났다.이러한 역설의 이유는 cyanidin-3-glucoside 가 위장관에서 대사 반응을 거치면서 혈액 및 관련 조직에 들어가는 관련 대사 산물을 생성하여 관련 생물학적 활성 효과를 나타내기 때문일 것이다.

이 연구를이 가설을 검증하는 것을 목표로, 사용 cyanidin-3-glucoside 실험 재료로, 생체 실험과 체외에서 실험적 방법을 사용 하여, 및 UPLC-MS/MS 탐지 방법으로, 질적으로하고 정량적으로 위장 기관에 cyanidin-3-glucoside 쥐의 대사 물질을 분석, 그리고 그 쥐는 위장 기관에서 신진대사의 그것의 변화를 탐색 할 수 있습니다.의 대사 물질을 분석 함 으로써 동시에, 쥐 피로 cyanidin-3-glucoside, 대사 물질의 흡수에 시신은 명확 해지 는지를 설명하는 데 기초를 제공의 대사 물질 cyanidin-3-glucoside 폭로로 기준을 제공하는 생물학적 활동과 관련을 가지고 cyanidin-3-glucoside의 활동 메커니즘이다.주요 연구 프로젝트의 내용 및 결과은 다음과 같다:

(1) AB-8대성 수지, 폴리아미드, 덱스트란 겔 컬럼에 cyanidin-3-glucoside를 정제하기 위해 흑미를 실험재료로 사용하였다.후 cyanidin-3-glucoside 정화의 내용은 95%이었고, 수율 0.098%었다.

(2) 실험물질로 cyanidin-3-glucoside를, 검출방법으로 UPLC-MS/MS 법을 이용하여 쥐 장에서 cyanidin-3-glucoside의 대사산물과 주요 대사부위를 in vitro 배양용액법을 이용하여 연구하였다.그 결과 쥐의 장에서 cyanidin-3-glucoside의 대사산물은 2,4,6-trihydroxybenzoic acid, protocatechuic acid, p-hydroxybenzoic acid, vanillic acid, hippuric acid, caffeic acid Phenolic aldehyde, p-coumaric acid, cyanidin-3-glucoside, cyanidin, ferulic acid 등 11개로 나타났다.주요 대사 부위는 공장, 회장, 대장이다.

(3) 로 cyanidin-3-glucoside를 사용 하여 실험 자료와 UPLC-MS/MS 방법으로 탐지 방법, 위, 십이지장, 공장, 회장, 그리고 결장의 쥐들은 수집 cyanidin-3-glucoside의 gavage 후 다른 시기에에 처 해 있다.cyanidin-3-glucoside의 대사산물이 검출되었으며, 2,4,6-trihydroxybenzoic acid, protocatechuic acid, p-hydroxybenzoic acid, vanillic acid, hippuric acid Caffeic acid, phloroglucinol aldehyde, p-coumaric acid, cyanidin-3-glucoside, cyanidin-3-glucoside, ferulic acid 등 총 11 종류가 검출되었으며, 제품 종류는 in vitro 법 결과와 일치하고, cyanidin-3-glucoside는 주로 위액에서 본래의 형태로 존재하며,반면 cyanidin-3-글루코사이드는 십이지장, 공장, 회장 및 대장에 주로 아글리콘 (cyanidin) 형태로 존재합니다.

(4) 실험물질로 cyanidin-3-glucoside를 사용하고 검출방법으로 UPLC-MS/MS 법을 사용하여 쥐 혈액 중 cyanidin-3-glucoside의 대사산물은 protocatechuic acid, p-hydroxybenzoic acid, vanillic acid, hippuric acid, caffeic acid는 phenolic aldehyde, p-coumaric acid, cyanidin-3-glucoside, cyanidin, ferulic acid 등 총 10가지가 검출되었으나 2,4,6-trihydroxybenzoic acid는 검출되지 않아 2,4,6-trihydroxybenzoic acid를 제외하고,시아니딘-3-글루코사이드의 다른 장내 대사 산물은 장을 통해 혈류로 흡수될 수 있습니다.비교를 통해, 그것은 공장의 주 된 흡수 사이트들은 그것을 발견 했고, 회장, 그리고 결장이다.

연구 결과를 통해 시아니딘-3-glucoside는 위장관에서 대사 반응을 거치면서 일련의 관련 대사 산물이 장을 통해 혈류로 흡수될 수 있음을 확인할 수 있습니다.

참조:

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